Lmo1在小鼠耳蜗中的表达模式及功能研究

来源 :杭州师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fslihua
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小鼠的内耳是一个复杂的结构,在发育的过程中其结构分化较为明显。核蛋白LMO蛋白家族由4个转录调节因子所组成,在细胞分化中起不同的作用。Lmo1在胚胎期的小鼠耳蜗中有表达,且与我们正在研究的GATA3,ISL1,ISL2等转录因子存在交互作用的可能,所以确定Lmo1对耳蜗发育的影响有助于理解早期耳蜗发育的调控网络的机制。本课题研究Lmo1敲除后对小鼠耳蜗发育的影响以及对成年小鼠的听力所造成的影响。利用原位杂交的检测出Lmo1在小鼠中的表达模式;在小鼠体内敲入报告基因LacZ从而敲除基因Lmo1,免疫荧光技术检测在Lmo1敲除后对小鼠柯蒂氏器结构的影响,主要是观察毛细胞、支持细胞以及从螺旋神经节是否发生改变,从而确定敲除Lmo1后对小鼠耳蜗发育影响。根据Lmo4的敲除结果,构建Lmo1/Lmo4双敲除的小鼠,研究Lmo1和Lmo4在耳蜗中的相互作用。Lmo1在小鼠胚胎期E13.5天表达于耳蜗中,且持续表达到出生后。实验结果显示出Lmo1敲除后对毛细胞、支持细胞以及螺旋神经节等没有明显的影响。听觉脑干电位反应(ABR)统计结果发现,野生型和突变体小鼠听力对比差异不明显。实验结果表示不是所有的Lmo4基因敲除都对产生异常的柯蒂氏器,概率约为30%,但是敲除Lmo4会导致耳蜗管变短,结构变形。双敲除基因Lmo1/Lmo4的结果发现小鼠的柯蒂氏器在形态结构上没有变化。
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