目的：从本实验室保种的重组质粒pBK-CMV-SjiGST中扩增出日本血吸虫(中国大陆株)26 kDa谷胱甘肽-S-转移酶(SjGST)编码基因，克隆至表达载体pET28a(+)；分别诱导表达本实验室保种的含有日本血吸虫信号蛋白14-3.3(Sj14-3-3)编码基因的重组表达载体pET28a(+)-Sj14-3-3和构建的重组表达载体pET28a(+)-sjGST；制备并分别纯化出重组蛋白Sj14-3-3和SjGST；将两者联合应用，建立重组抗原间接ELISA方法(rSj-ELISA)诊断日本血吸虫病。棋盘滴定法确定最适抗原包被量和血清稀释度，用于急、慢性血吸虫病诊断，并与成虫粗抗原(sjAWA)的间接ELISA，以及间接血凝试验(IHA)和环卵沉淀试验(COPT)平行检测，比较几种方法的敏感性和特异性之间的差异。同时比较3种方法在华支睾吸虫和钩虫感染者之间的交叉反应性，以探讨重组抗原用于诊断血吸虫病的实用性和可靠性。 方法：提取含SjGST编码基因的重组质粒pBK-CMV-SjGST，PCR扩增出目的片断，将扩增产物克隆入表达载体pET28a(+)，诱导表达出rSjGST；同时诱导含Sj14-3-3编码基因的重组质粒pET28a(+)-Sj14-3-3表达出rSj14-3-3。SDS-PAGE和Western blotting验证表达量和免疫活性，并分别用亲和层析法纯化重组蛋白，并用Bradtbrd法检测二者的含量。将rSj14-3-3和rSjGST按1：1比例联合应用包被反应