论文部分内容阅读
目的 一、利用Hassab手术时切断迷走神经，脾切除、胃冠状静脉栓塞术时保留迷走神经这一特点，应用99mTc-EHIDA（二乙基乙酰替苯胺亚氨二醋酸）动态显像的方法，对比研究两种术式术前术后胆囊及Oddi括约肌（SO）运动功能，为进一步阐明人迷走神经在胆囊及Oddi括约肌运动中的作用提供有力依据。 二、研究肝硬化门静脉高压症患者行Hassab手术前后空腹血中胆囊收缩素（CCK）、P物质（SP）、胃泌素（Gas）、血管活性肠肽（VIP）、生长抑素（SS）及胃动素（MTL）等胆道动力相关激素水平的变化，探讨肝硬化患者胆道动力异常的机制及在消化间期迷走神经对肝硬化患者胆道动力的影响。 材料与方法 一、实验试剂和仪器 1．实验试剂： 99mTc：由中国科学院原子能研究所提供； EHIDA：由中国科学院原子能研究所提供； 医用a-氰基丙烯酸脂单体（简称TH胶）：由广州白云医用胶总公司提供； ENSURE：由美国雅培公司提供。250ml标准冲调液含ENSURE粉50g，热量1046.0KJ，蛋白14.0％，脂肪31.5％，碳水化合物54.5％； 放免试剂盒：由北京华英生物技术研究所提供； 生理盐水，含0.2％BSA； ED7A-Na2； 抑肽酶； 丙酮； 乙酸乙酯-乙醚合液（3／1 V／V）。 2．实验仪器： 动态核素显像设备为美国GE公司Hawkeye; 高速冷冻离心机:德国Heraeus公司Labofuge 4o0R型; 深低温冰箱:德国Heraeus公司; 空调:日本三菱公司KFR一34G/BPA型; 多管放射免疫计数器:众成机电技术公司DFM一%型。 二、实验方法 （一）门奇静脉断流术前后胆囊及50运动功能的研究 1.实验对象: 肝硬化门静脉高压症患者23例，男13例，女10例，平均年龄51岁，有不同程度的脾大、脾功能亢进，经胃镜检查发现有食道胃底静脉曲张，经B超检查确认均无胆道疾病。肝功能Child分级均为A级。 2.术式: （1）Hassab手术组:18例，男10例、女8例，平均年龄50岁。行脾切除后离断及结扎上自责门上6cm，下至胃大小弯上1/2的周围动静脉，游离食道下段时切断迷走神经前后干。 （z）栓塞术组:5例，男3例、女2例，平均年龄53岁。行脾切除、胃冠状静脉栓塞术。方法为行脾切除后解剖胃冠状静脉主干，近根部结扎，在结扎线的头侧穿刺注射TH胶sml。 3.放射性核素动态显像: 全组病人均在术前3天及术后第10天空腹静脉注射99mTC一EHIDA1 85MBq，0.25分/帧动态显像。连续30分钟后食标准脂餐（ENSU甩250而标准冲调液），再连续动态显像60分钟。 4.数据采集及分析: （1）胆囊的数据采集及分析:画出胆囊感兴趣区（ROI），建立感兴趣区的时间放射性曲线，并采用以下7个指标对曲线进行对比分析: ①注射，gmTc一EHxDA 30分钟后胆囊的放射性计数（GBRC3O而n）; ②排胆分数（GBEF，%）; ③排胆期（GBEp，而n）; ④排胆率（GBER，%/min）; ⑤潜伏期（GBLP，而n）: ⑥潜伏期放射性计数的增量（GBu）; ⑦潜伏期放射性计数的增加率（GBLR，%）。 （2）oddi括约肌的数据采集及分析:画出肠道Rol，建立感兴趣区的时间放射性曲线，并采用以下5个指标对曲线进行对比分析: ①注射99mTC一EHIDA30分钟后肠道的放射性计数（BORC30而n）; ②潜伏期（BOLP，而n）; ③脂餐后肠道放射性计数快速增加期（B OIP，而n）; ④BOIP内肠道放射性计数的增加量（Bol）; ⑤BOIP内肠道放射性计数的增加率（BoIR，%/而n）。 （二）Hassab前后血中胆道动力相关激素的水平研究 1.实验对象: （1）肝硬化门静脉高压症患者14例，男9例，女5例，平均年龄50岁，术前肝功能Child分级均为A级。行Hassab手术。 （2）正常对照组10例，符合下列条件:无肝胆疾病病史;排除肝胆疾病和门静脉高压症;无影响肝胆胃肠运动的全身性疾病;无严重的心、肺及肾疾病。 2.标本采集与保存: （l）肝硬化患者均在术前及术后第7天清晨空腹抽静脉血10nil，正常对照组也在清晨空腹抽静脉血10nil。 （2）血浆的保存:EDTA一Na230闪—抑肤酶40闪—静脉血8祖—4℃离心（2000转x 20min）—取上清一20℃保存。 （3）血清的保存:取静脉血Znilee一一礴℃离心（2000转x 20min）—取上清一20℃保存。 3.放免检测: （l）CCK、SP、55、MTL、VIP检测:待测血浆分5份，分别加冷丙酮混匀一一4℃离心（2000转x20min）—取上清加冷乙酸乙醋一乙醚合液混匀一科℃离心（2000转x20min）—弃上相取下相—冷风吹掉残余有机溶剂—分别加CCK抗体、sP抗体、sS抗体、M，I’L抗体、VIP抗体一-晌礴℃放置24小时—分别加‘251一eCK、’251一sP、‘251一55、’251一M几、’25x-VIP一一一4℃放置24小时—分离剂15min—离心（3000转x 15min）弃上清—测定cPm数。 （2） Gas检测:EDTA溶液—待测血清—抗体—1251一GaS.一-4℃放置24小时—分离剂巧min—离心（3000转x巧 min）弃上清—测定epm数。 三、统计学处理 1.各指标术前术后差?