目的和意义:人参是一种传统的中药,其主要有效成分是人参皂苷。但人参皂苷-Rg3、人参皂苷-Rh1、人参皂苷-Rh2等人参次级皂苷,在人参中的天然含量极少,故常采用酸催化法来人工制备这些次级皂苷,其过程中会不可避免的产生20位侧链具有三甲基四氢吡喃环结构的人参二醇、人参三醇组分。经研究证明,该组分极性较小,且不再具有显著的药理活性,无临床直接开发价值。因其来源于名贵中药材人参,弃之造成资源的极大浪费,故本实验将其作为潜在的化合物资源向着新药先导化合物方向加以转化研究、开发利用研究,以期获得抗肿瘤活性更好的人参皂苷衍生物。研究方法:(1)以人参二醇、人参三醇组分为反应底物,采用组合化学的方法,用催化剂H对其结构进行修饰。(2)用薄层色谱法,分别在苯/石油醚,石油醚/乙醇、甲醇/水,石油醚/甲醇溶剂系统中鉴定反应产物的极性变化从而监控组合化学结构修饰反应的进程。(3)用快速制备液相法,在甲醇/水与石油醚/乙醇溶剂系统中对反应产物进行分离,在203 nm与254 nm紫外波长下对分离状态进行监测,并用薄层色谱法验证分离结果。(4)用MTT比色法检测底物与产物组分,在浓度为5、25、50mg/L浓度的条件下对B16-F10小鼠黑色素瘤细胞与SMMC-7721人肝癌细胞增殖的抑制作用。(5)用平行合成仪探究人参二醇、人参三醇组分分别与催化剂H反应的合适时间。实验结果:(1)人参二醇、人参三醇组分与催化剂H加热回流72小时后,通过薄层色谱法鉴定出人参二醇、人参三醇组分在本反应条件下发生了化学转化,得到了极性比底物大及比底物小的产物组分。(2)通过快速制备液相色谱进行分离纯化反应产物组分,在分离系统为石油醚/乙醇的条件下分离得到三个产物组分,分别记为产物组分1、2、3。通过薄层色谱实验发现,极性较小的部分集中于产物组分1中,极性较大的组分集中于产物组分3中。(3)通过MTT比色法实验发现,对于B16-F10小鼠黑色素瘤细胞,人参二醇人参三醇组分、产物组分1、2、3对其增殖均具有抑制作用,但产物组分1、产物组分3对B16-F10小鼠黑色素瘤细胞增殖的抑制作用显著优于人参二醇人参三醇组分:对于SMMC-7721人肝癌细胞,产物组分1、产物组分3对其增殖有抑制作用,而人参二醇人参三醇组分、产物组分2对其增殖均无抑制作用。(4)在人参二醇、人参三醇组分分别与催化剂H平行反应后,通过薄层色谱实验发现,48 h后反应完全,人参二醇、人参三醇组分完全转化。实验结论:(1)人参二醇、人参三醇组分为底物,以化合物H为催化剂,以水为溶剂,通过组合化学法在100℃的条件下使人参二醇、人参三醇组分发生了转化,得到了与底物不同的产物组分1、产物组分2、产物组分3。(2)建立了以石油醚/乙醇为溶剂系统,方便、快捷的正相薄层色谱分析方法。(3)建立了以石油醚/乙醇为溶剂系统的快速制备液相制备分离方法。(4)得到的产物组分1与产物组分3,对B16-F10小鼠黑色素瘤细胞、SMMC-7721人肝癌细胞有抑制活性。