MLCK、钙通道蛋白在高甘油三酯血症相关性急性胰腺炎的表达及其关系研究

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:helen_shen
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目的观察高甘油三酯相关性急性胰腺炎(hypertriglyceridemia associated acute pancreatitis,HTGP)大鼠模型的胰腺病理损伤、超微结构、血淀粉酶及细胞间紧密连接(Tight junction,TJ)改变,肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)、钙通道蛋白Cav1.2、Cav2.1、Cav2.2的蛋白表达水平,探讨大鼠胰腺组织中MLCK与Cav1.2、Cav2.1、Cav2.2的表达及其相互关系。方法48只雄性SD大鼠随机分为正常饲料组(A组)和高脂饲料组(B组),喂养4周后,测量血清甘油三脂含量(triglyceride,TG)。正常饲料组随机分为三个亚组:空白对照组(N组)、急性胰腺炎组(AP组)、AP+ML-7干预组;高脂饲料组随机分为三个亚组:高甘油三酯血症组(HTG组)、高甘油三酯血症相关性急性胰腺炎组(HTGP组)、HTGP+ML-7干预组。腹腔注射雨蛙肽(50μg/kg)建立急性胰腺炎模型,造模后24h处死大鼠,测定血清淀粉酶(amylase,AMY);光镜下观察胰腺病理变化;透射电镜下观察胰腺细胞超微结构与TJ改变;免疫组织化学法检测胰腺组织MLCK、Cav1.2、Cav2.2的表达及定位;免疫荧光法检测胰腺组织MLCK、Cav1.2、Cav2.1、Cav2.2的表达及定位。结果正常饲料组和高脂饲料组的TG水平分别为(1.16±0.33)mmol/L、(3.30±1.07)mmol/L,高脂饲料组的TG水平较正常饲料组显著升高(P<0.01)。与AP组比较,HTGP组血清淀粉酶含量、胰腺病理评分显著升高(均P<0.05);ML-7干预后血清淀粉酶含量降低及胰腺病理损伤减轻。免疫组化方法检测大鼠胰腺中MLCK、Cav1.2、Cav2.2,HTGP组、AP组中MLCK、Cav1.2、Cav2.2表达均较HTG组、N组明显上调(均P<0.05),其中HTGP组MLCK、Cav1.2、Cav2.2的表达较AP组显著增加(均P<0.05);ML-7能够有效抑制MLCK、Cav1.2、Cav2.2的表达。免疫荧光方法分别检测大鼠胰腺组织中MLCK、Cav1.2、Cav2.1、Cav2.2,HTGP组、AP组中MLCK、Cav1.2、Cav2.1、Cav2.2荧光强度均较HTG组、N组明显,其中HTGP组MLCK、Cav1.2、Cav2.1、Cav2.2的荧光强度较AP组显著增加(均P<0.05)。透射电镜下观察AP组、HTGP组胰腺细胞超微结构损伤及TJ增宽,其中以HTGP组增宽最显著;ML-7干预后TJ增宽减小。结论HTGP大鼠胰腺组织MLCK、Cav1.2、Cav2.1、Cav2.2表达上调,其可能与疾病严重程度相关,且MLCK可能通过改变TJ及调控钙通道蛋白Cav1.2、Cav2.1、Cav2.2的表达参与HGTP的发病机制。
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