保加利亚乳杆菌抗后酸化酸奶菌株的UV、NTG诱变选育

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乳酸菌直投式发酵剂是影响酸奶质量的主要因素之一,我国虽然经过多年攻关,但后酸化问题一直未能很好解决。本研究对保加利亚乳杆菌ZLB进行了紫外线(UV)、亚硝基胍(NTG)的诱变选育,最终得到一株后酸化弱的菌株UN116。相关的研究结果如下: 采用液体MRS培养基,对ZLB的培养条件进行了优化,得到最佳培养条件为:培养温度42℃,最初pH值为6.6。最佳培养条件下,菌株ZLB培养后10h为诱变前菌体的收获时间。对ZLB分别进行UV、NTG诱变,然后用青霉素处理,涂布培养后,得到UV处理突变株ZU05和NTG处理突变株ZT227。ZU05与ZLB接种于RSM(ReconstitutedSkimmedMilk)培养基,在42℃下培养产酸量一样。ZU05与ZLB接种于RSM中,42℃下发酵至pH为4.6,然后在12℃贮藏,ZU05比ZLB产酸量显著减少(p<0.01),贮藏20d时,滴定酸度分别为132.2°T(ZU05)和166.2°T(ZLB)。ZT227与ZLB相比,在42℃下培养时产酸量明显减少(p<0.01);ZT227与ZLB接种于RSM中,发酵至pH为4.6,然后在12℃贮藏,ZT227比ZLB产酸量显著减少(p<0.01),贮藏20d时,滴定酸度分别为145.4°T(ZT227)和166.2°T(ZLB)。ZU05与ZLB对链霉素的敏感性不同,且能稳定遗传。 对变异菌株ZU05进一步NTG诱变,然后用青霉素处理,涂布培养后,得到突变株UN116。该菌株接种于RSM培养基,在42℃下培养,与ZU05相比,变异菌株UN116产酸量显著减少(p<0.01)。将UN116接种于RSM,42℃下发酵至pH为4.6,然后在12℃贮藏12d,滴定酸度值最高为103.4°T,而ZU05滴定酸度值最高为125.8°T。实验表明UN116菌株能稳定遗传。
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