硒是人和动物必需的微量元素,其生理作用基础是作为谷胱甘肽过氧化物酶的活性中心,缺硒会导致多种疾病的产生。植物硒是人体硒的重要来源,通过对作物施硒可以提高食物链中的硒含量,改善作物品质,提高作物产量和增强作物抗逆性。丹参是我国传统中药材,具有多种重要的生理功能,其药理作用与硒的生物无机化学性质相似,富硒丹参可能融合硒与丹参的功效于一体,提高丹参的药效品质。植物对硒的吸收和转化是富硒植物研究的重要内容,本文对富硒丹参根中硒的主要赋存形式进行研究,并对主要赋存物质进行体外抗氧化活性研究,以了解无机硒化合物在丹参根中的生物转化效率以及硒赋存物质的体外抗氧化活性。采用不同溶剂分别提取丹参中的多糖、核酸和蛋白质;运用分光光度法测定多糖、核酸和蛋白质的含量,氢化物-原子荧光法和石墨炉原子吸收法测定硒含量。用0.1 mol/L NaCl提取丹参多糖溶液,Sevage试剂脱蛋白、透析、浓缩、乙醇沉淀得丹参粗多糖;结果显示多糖含量随丹参中硒含量的增加而增加,多糖结合硒含量也随丹参硒含量增加而增加,硒能影响丹参多糖的代谢,促进含硒多糖的合成。利用DEAE-52纤维素层析柱对富硒丹参多糖进行分离纯化,得到四个组分的硒多糖。红外光谱显示对照组丹参多糖和四个组分的含硒多糖均是β-吡喃环多糖,硒主要以硒酸酯的形式存在,另外可能含有Se-H结构。运用SephadexG-200凝胶层析柱进一步分离纯化四种硒多糖,每一个组分又分离得到两种含硒组分,其中一个组分为不含多糖和蛋白、分子量大于600000 Da的大分子硒化物。分别用0.03 mol/L不同酸度的两种磷酸缓冲溶液和去离子水、0.5 mol/L NaCl、75%乙醇溶液、0.1 mol/L NaOH四种溶液连续提取丹参蛋白质,浸提液经饱和硫酸铵沉淀、透析、浓缩得丹参粗蛋白,结果显示丹参蛋白含量随硒含量的增加而增加。6种溶剂提取的丹参蛋白质含量和结合硒含量呈高度正相关关系（p<0.007）,表明硒与丹参蛋白结合在一起,硒对丹参蛋白质的合成有促进作用。利用DEAE-52纤维素层析柱对丹参蛋白进行分离纯化,得到两个组分的硒蛋白和一个不含硒的蛋白。红外光谱显示对照组丹参蛋白和三个组分的丹参蛋白是β-折叠结构,丹参含硒蛋白中可能存在硒酸酯结构。Sephadex G-75凝胶层析柱进一步分离纯化上述三个组分的蛋白质,所有蛋白组分均在外水体积处出现;SephadexG-200凝胶层析柱分离得到同样的结果,表明丹参蛋白分子量超过SephadexG-200分离的最大分子量600000 Da。用2%的十六烷基三甲基溴化铵缓冲溶液提取富硒核酸,苯酚-氯仿-异戊醇混合液萃取分离蛋白质,异丙醇和70%乙醇除多糖和无机小分子杂质。测定得核酸含量为0.61%,硒含量占丹参总硒的2.30%。硒在丹参中的赋存形态分布为:蛋白质结合硒占总硒的74.2%,多糖结合硒占总硒的31.1%,核酸结合硒占总硒的2.3%。由于糖蛋白和核酸蛋白的存在,蛋白质交叉出现在多糖和核酸中,使得三类物质赋存硒的比例超过100%。在水、NaCl溶液、乙醇溶液和NaOH溶液连续浸提的组分中,水溶性蛋白质上的硒含量最高,占总硒的46.0%。两种酸度磷酸缓冲溶液连续浸提的弱酸溶性和弱碱溶性蛋白质中,弱碱溶性蛋白上硒含量最高,占总硒的51.2%。富硒丹参中硒主要以含硒蛋白和含硒多糖的形式存在,丹参富硒栽培能有效实现无机硒的有机化。最后,采用清除Fonton反应产生羟基自由基和还原Fe³⁺的总还原能力实验,对普通丹参和富硒丹参多糖和蛋白质组分的抗氧化活性进行对比研究。结果表明富硒丹参多糖和蛋白质清除羟基自由基能力和总还原能力高于对照组丹参多糖和蛋白;在多糖含量和蛋白质含量相等的条件下,清除羟基自由基能力与总还原能力与硒含量呈现出剂量-效应关系。与单独Na₂SeO₄和丹参多糖或蛋白的清除能力和还原能力相比,Na₂SeO₄与丹参多糖或蛋白联合作用清除自由基能力与总还原能力有协同效应,丹参硒多糖和丹参硒蛋白的作用能力高于无机硒与丹参多糖或蛋白的联合作用。丹参硒蛋白与硒多糖具有优于丹参多糖和蛋白的体外抗氧化活性,富硒丹参成分作用于人体可能具有更为优越的抗氧化活性。