Apicidin对子宫内膜癌细胞的凋亡及HDAC4和P21表达的影响

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目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂apicidin对子宫内膜癌细胞的凋亡及HDAC4和P21表达的影响。方法:体外培养正常子宫内膜上皮细胞,高分化子宫内膜癌细胞株HEC-1-B,低分化子宫内膜癌细胞株KLE,应用流式细胞技术分别检测在HEC-1-B细胞、KLE细胞中加入组蛋白去乙酰化酶抑制剂apicidin(终浓度为0,0.5,1.0μ mol/l),作用24h及48h后的细胞凋亡率。Western blot法检测子宫内膜细胞、HEC-1-B细胞、KLE细胞三组及0.5μ mol/lapicidin干预24h后两组肿瘤细胞中的HDAC4和P21表达情况。结果:1.流式细胞仪检测结果为:①0、0.5、1.0μ mol/l apicidin作用24h后,KLE细胞的凋亡率分别为(7.45±1.88)%、(17.47±2.08)%、(40.84±1.75)%,HEC-1-B细胞细胞的凋亡率分别为(4.01±0.46)%、(11.28±1.32)%、(16.76±1.35)%。随着apicidin作用浓度的增加,两种细胞凋亡率均明显升高(P<0.05)。②0、0.5、1.0μ mol/l apicidin作用48h后,KLE细胞的凋亡率分别为(12.02±0.37)%、(21.53±2.18)%、(57.10±1.43)%,HEC-1-B细胞的凋亡率分别为(6.59±0.75)%、(14.07±1.65)%、(23.80±1.70)%。随着apicidin作用浓度的增加,两种细胞凋亡率均明显升高(P<0.05)。③经统计学分析:随着apicidin作用浓度及作用时间的增加,两种细胞凋亡率均明显升高(P<0.05),且相同浓度的apicidin作用相同时间后,KLE细胞的凋亡率高于HEC-1-B细胞的凋亡率(P<0.05)。2. Western blot结果显示:①子宫内膜细胞、HEC-1-B细胞、KLE细胞三组细胞HDAC4条带的灰度值分别为:(0.69±0.04),(0.82±0.02),(0.94±0.04),P21条带的灰度值分别为:(1.09±0.03),(0.85±0.09),(0.69±0.09),统计结果显示:HDAC4在正常子宫内膜细胞及HEC-1B,KLE细胞中的表达呈升高趋势,而P21呈减少趋势(P<0.05)。②0.5μ mol/lapicidin干预24h后HEC-1-B细胞、KLE细胞中的HDAC4条带的灰度值分别为:(0.73±0.04),(0.76±0.03),P21条带的灰度值分别为:(1.04±0.05),(0.90±0.09),统计结果显示:apicidin作用后KLE、HEC-1-B细胞中HDAC4减少,而P21增加(P<0.05)。结论:1. Apicidin可促进不同子宫内膜癌细胞的凋亡,且凋亡率存在时间-浓度依赖性。2. HDAC4和P21的含量可能与子宫内膜癌细胞的分化程度有关。3. Apicidin通过抑制HDAC4而上调P21的表达可能是促进子宫内膜癌细胞凋亡的原因之一。
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