【摘 要】
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Pyk10是拟南芥中的一种根特异性表达启动子。在本研究中,我们通过PCR技术从拟南芥DNA中分离得到Pyk10,并通过分析可知该pyk10启动子和已公布的拟南芥pyk10启动子(GenBank no.
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Pyk10是拟南芥中的一种根特异性表达启动子。在本研究中,我们通过PCR技术从拟南芥DNA中分离得到Pyk10,并通过分析可知该pyk10启动子和已公布的拟南芥pyk10启动子(GenBank no.:AJ292756.1)相似性达到98%。通过取代3301载体上1077bp-1131bp处的35S启动子构建了pyk10-3301,并运用浸花法侵染拟南芥。对转基因拟南芥进行GUS组织化学染色检测,显示pyk10启动子驱动gus基因在拟南芥的根部特定表达。油菜素内酯(BRs)受体是位于细胞膜上的富含亮氨酸蛋白激酶BRI,该受体激酶在油菜素内酯的信号转导过程具有非常重要的作用。在本研究中,我们从玉米B73克隆得到了ZmBRI基因。ZmBRI基因开放阅读框编码604个氨基酸,分子质量为66.81 kDa,等电点为6.16。通过生物信息学分析预测ZmBRI基因具有蛋白激酶C结构域和亮氨酸重复片段,该两个结构域是BRI蛋白家族的保守结构域。并进行功能分析,诱导表达结果表明ZmBRI基因受非生物逆境胁迫高盐和油菜素内酯(BR)的诱导上调,而受脱水、干旱、脱落酸(ABA)和NO信号诱导下调。在ZmBRI基因过表达的转基因拟南芥中,我们发现转基因株系的叶面积比野生型的大,也比野生型的拟南芥提前开花,并且无论是在正常条件下还是BR处理条件下,转基因拟南芥的气孔开度均小于野生型的气孔开度。在本试验中我们也获得ZmBRI的转基因玉米自交系。本研究初步明确了ZmBRI基因的生物学功能为以后进行玉米分子育种奠定理论基础。
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