FBXL20通过激活Wnt/β-catenin通路促进人类食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭

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目的:研究FBXL20在食管癌中的表达,初步探究在食管癌中的作用及其相关机制。为食管癌的早期诊断,早期治疗以及预后的评价提供新的生物学标记物。方法:通过q RT-PCR以及免疫组化技术来检测FBXL20基因在食管癌及癌旁组织中m RNA和蛋白层面表达的差异。通过q RT-PCR筛选FBXL20表达量较高的两株食管癌细胞株,并进行慢病毒转染。通过q RT-PCR和Western blot技术来分析转染前后细胞株中FBXL20 m RNA和蛋白表达水平差异。通过流式细胞术检测沉默表达FBXL20对细胞周期和凋亡的影响。通过单克隆形成和CCK-8实验检测沉默表达FBXL20对细胞增殖能力的影响。通过Transwell实验检测沉默表达FBXL20对细胞迁移和侵袭能力的影响。通过Western blot实验分析FBXL20及Wnt/β-catenin信号通路相关的因子表达情况。数据统计分析选用Graph Pad Prism5和SPSS 17.0软件。结果:本实验证实FBXL20在食管癌组织中较癌旁组织中是高表达,表达存在差异性。由此推测FBXL20可能在食管癌中是致癌基因,且对于食管癌的过程起到促进作用。在体外实验,成功构建稳定转染的沉默表达FBXL20的EC109和KYSE150食管癌细胞株,沉默表达FBXL20可以使细胞周期阻滞,增加细胞凋亡率,从而抑制细胞增殖,同时沉默表达FBXL20细胞的迁移、侵袭能力降低。我们证实FBXL20通过Wnt/β-catenin信号通路从而发挥促进食管癌发展的作用。结论:该研究证实了FBXL20在食管癌中起致癌作用,可能成为一个癌基因治疗靶点。该研究初步阐释FBXL20的作用机制,可能为食管癌患者的治疗提供更多的策略。
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