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目的:观察在周围神经变性过程中产生的可溶性蛋白对背根神经节(DRG)的轴突生长的影响。方法:分别在无血清和有血清的条件下将新生鼠的背根神经节和体内变性14天的大鼠坐骨神经段进行联合培养作为实验组,并以在相应条件下单独培养的DRG的轴突的生长情况作为对照组来观察比较轴突的生长情况。应用不连续GDS-PAGE分离可溶性蛋白。结果:(1)在无血清条件下单独培养的DRG,背根神经节的轴突数目众多,外形纤细弯曲,不成束,并且施万细胞(SCs)和成纤维细胞稀少,所以可以排除两者对轴突生长的影响,为观察来源于变性坐骨神经段的可溶性因子对轴突生长的作用提供了有利条件;(2)在无血清条件下DRG和变性坐骨神经段联合培养,①先单独培养DRG,4天后待神经元轴突长出,再与坐骨神经段联合培养,观察到神经元的轴突数目减少,外形挺直,部分轴突之间相互粘附成束;②变性坐骨神经段和DRG同时联合培养,神经元的轴突数目明显减少,外形粗壮,轴突之间相互粘附成束;(3)有血清条件下单独培养DRG,轴突数目较多,外形挺直,长短不一,部分神经元的轴突之间相互粘附,施万细胞和成纤维细胞数目众多,观察到的轴突生长情况受到施万细胞和成纤维细胞的直接或者间接的影响。(4)有血清条件下联合培养,观察到神经元的轴突环绕坐骨神经段生长,呈现诱导现象,并且能够促使轴突长度明显增长。(5)通过电泳分离得到12条蛋白条带,蛋白分子量集中在30-120KDa。结论:变性神经段中可溶性因子能够促进神经元轴突的生长、轴突直径增加;通过形成浓度梯度诱导轴突生长的方向、减少背根神经节再生轴突数目和使背根神经节轴突之间相互粘附。意义:(1)本实验在体外模型中首次观察到背根神经节的轴突在变性坐骨神经段产生的可溶性蛋白的作用下发生数目减少和粘附成束的现象,丰富了对周围神经再生微环境中可溶性蛋白生物学效应的认识;(2)实验结果提示,①虽然周围神经再生微环境中可溶性蛋白因子总体表现为促进再生轴突的生长,但是并不是微环境中的每种蛋白因子都能够促进轴突生长,所以去除不利轴突生长的蛋白因子,有序添加有利轴突生长的蛋白因子将会进一步促进轴突生长和成熟。鱼类和两栖类视神经一顶盖再生模型提示神经再生是一个有序的、分阶段的过程,神经再生的不同阶段有相应的因子或者因子组合发挥作用,违反这种有序性将会对轴突的再生产生不利的影响;②无血清条件下单独培养的背根神经节中神经元的轴突处于“原始”状态,施万细胞和成纤维细胞稀少,减少了对观察外源性蛋白生物学效应的干扰,并且可以观察轴突与轴突之间的相互作用,是检测蛋白因子对轴突生长影响的良好模型,为以后研究中观察一种蛋白因子对神经元轴突生长的生物效应或多种蛋白因子对神经元轴突生长的联合效应奠定了基础。