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1相关的文献研究高脂血症是当今一种很常见的慢性疾病,其发病的原因是由于机体的脂质代谢紊乱,导致机体代谢失去平衡,有关的物质大量积累,引发脂肪肝、糖尿病、动脉粥样硬化、高血压及心血管疾病等,极大地威胁着人们的生命健康。高脂血症的临床表现为血清TC、TG的浓度较高,HDL-C的浓度较低。目前有较多的中药及复方用于高脂血症的治疗,并取得了较好的疗效。泽泻汤是出自东汉医圣张仲景《金匮要略》里的经典验方,该药方由泽泻、白术两位中药材配伍组成,泽泻的作用重在利水下行、祛湿功效,可以使已停之饮从小便而去；白术的作用则重在健脾制水功效,可以使水湿既化而不复聚。该方最早用于治疗昏冒眩晕,后来也用于治疗高脂血症,实际上是对泽泻汤应用范围的进一步扩大,用药作用目的及机理基本相同。并经过长期的临床验证,证明该方有较好的降血脂作用。但是目前对泽泻汤降血脂机理方面的研究文献不多,且作用机理没有得到较好地阐明,还处在初期的探索阶段。普遍认为泽泻汤降血脂的作用机理有,泽泻汤能影响外源性胆固醇的吸收,或者是泽泻汤能干预机体对内源性胆固醇的分解代谢,同时泽泻汤的降血脂作用还可能与其能提高机体的抗氧化能力,降低机体的氧化应激性有关。也有学者认为,一些中药降血脂的作用机理还可能与药物能对机体的肝,脾、肾的保护作用有关,调节这些器官功能的平衡,有助于维持机体正常的生理功能,调节脂质代谢紊乱等作用有关。用分子生物学手段研究泽泻汤的进行作用机制也处在探索的阶段。对肝脏中调节胆固醇合成的基因以及影响影响胆固醇合成、促进胆固醇分解的关键酶等(如Hmgcr、Srebf2、Fasn、Cyp7a1等)的研究,是目前降血脂药物机理研究的重点之一,对调节高脂血症的关键基因进行研究可能是从根本上阐明药物降血脂作用的有效方法。对泽泻汤降血脂作用的机理的阐明一方面可以指导临床用药安全,另一方面也是寻找及开发新型降血脂药物的有效途径,具有重要意义。2实验部分2.1泽泻汤降血脂作用机理初步研究目的：通过泽泻汤对高脂血症小鼠血脂的影响,初步探讨泽泻汤降血脂的作用机理。方法：采用高脂饲料喂养法建立小鼠实验性高脂血症模型,将高脂血症小鼠分成6个组,分别为高脂血症模型组,正常对照组,阳性组,泽泻汤水提取物高、中、低三个剂量组。用泽泻汤水提物高、中、低三个剂量组连续给药4w,观察并记录各组小鼠的行为及生活状况。摘眼球取血,分离血清,测定高脂血症小鼠血清TC、TG、HDL-C、SOD、 MDA、ALT、AST等生化指标,观察各组织器官的病理变化及取部分肝脏用10%的福尔马林固定,石蜡包埋切片,HE染色后进行光镜检查。其余的脏器置于-80℃冰箱保存备用。结果：给药4w后,高脂血症小鼠血清TC、TG显著降低,HDL-C、SOD显著升高,ALT、AST也显著降低。结论：中药泽泻汤水提取物对高脂血症小鼠有较好的降血脂作用,且高剂量组效果最好。其降血脂作用机理可能是对肝、肾、脾等脏器的保护,调节机体代谢平衡,以及改善机体抗氧化能力,减小氧化应激性等。2.2泽泻汤的LC-MS/MS指纹图谱的建立目的：通过建立泽泻汤水提取物的LC-MS/MS指纹图谱,标准化泽泻汤降血脂的有效成分,为泽泻汤降血脂作用机理的研究奠定基础。方法：采用LC-MS/MS联用技术,以实验一中使用的泽泻汤水提取物为样本,建立泽泻汤降血脂有效成分的指纹图谱。结果：建立了泽泻汤降血脂有效成分的指纹图谱。结论：该方法建立的泽泻汤指纹图谱方便、可行,能有效地对泽泻汤降血脂有效成分进行控制,标准化了泽泻汤的各成分,对研究泽泻汤降血脂作用以及降血脂作用机制的研究提供了实验依据。2.3泽泻汤降血脂作用机理研究目的：通过对泽泻汤进行拆方与组方研究泽泻汤的降血脂作用,探讨泽泻汤降血脂作用的机理。方法：对泽泻汤进行拆分,先分别制备泽泻,白术,以及复方泽泻汤的水提取物。采用高脂饲料喂养法建立小鼠实验性高脂血症模型,将高脂血症小鼠分成6个组,分别为高脂血症模型组,正常对照组,阳性组,泽泻汤水提取物组、泽泻水提取物组、白术水提取物组。用泽泻汤水提取物、泽泻水提取物、白术水提取物连续给药4w,观察小鼠的行为及生活状况。摘眼球取血,分离血清,测定高脂血症小鼠血清TC、TG、HDL-C、SOD、MDA、ALT、AST等生化指标,观察各组织器官的病理变化及取部分肝脏用10%的福尔马林固定,石蜡包埋切片HE染色后进行光镜检查,各组织置于-80℃冰箱保存备用。研究复方泽泻汤水提取物、单一的泽泻水提取物、白术水提取物对高脂血症小鼠的血脂影响,并采用现代分子生物学技术,研究泽泻汤等对调血脂的关键基因(Hmgcr、Srebf2、Fasn、Cyp7a1)表达的影响。结果：泽泻汤水提取物组仍然有较好的降血脂作用,泽泻水提取物组也有较弱的降血脂作用,而白术水提物组基本没有降血脂作用。泽泻汤对高脂血症小鼠肝脏中Hmgcr、Srebf2、Fasn的表达有较显著地抑制作用,而对Cyp7a1的表达无显著作用。结论：泽泻汤有较好的降血脂作用,其降血脂作用与泽泻和白术的配伍协同作用有关,其降血脂作用机理还与泽泻汤能调节胆固醇的合成与代谢基因表达有关,泽泻汤通过抑制Hmgcr、Srebf2、Fasn的表达,抑制胆固醇的合成,从而降低血清TC、TG等生化指标,其到降血脂的作用。