【目的】 CVB3是引起VMC的主要病原体之一，其发病机制尚未完全阐明。目前多认为早期主要是病毒直接侵犯心肌，后期则主要以病毒或受损心肌引起的免疫病理损害为主。有效的药物治疗措施尚缺乏。中西医结合治疗可为VMC的治疗开辟新途径。本实验通过制造CVB3小鼠心肌炎模型，用黄芪、大青叶、山药等中药治疗后，试图探讨更好的抗CVB3心肌炎药物及黄芪、大青叶、山药治疗CVB3心肌炎对PFP的影响。 【方法】 本实验将CVB3稀释液0．1ml腹腔注射至Balb/C小鼠体内，建立小鼠VMC动物模型后，随机分为四组：感染对照组给予生理盐水灌胃，其余三组分别给予黄芪、大青叶、山药水煎剂灌胃治疗，按不同时间点观察小鼠心肌组织病理改变及半定量分析其程度，并进行心肌组织病毒分离，及用免疫组化SABC法检测小鼠心肌组织炎性细胞中穿孔素(PFP)的表达。为进一步观察心肌细胞超微结构，于感染后第7d取部分小鼠心肌作透射电子显微镜检查。初步探讨黄芪和大青叶治疗VMC的作用机制。 第四军医大学硕士研究生学位论文 一 【结果】 一 心肌组织光镜检查结果 常规HE染色，光镜下观察显示：①正常对照组小鼠心肌组织结构层次 明显，心肌细胞核清晰可见，核仁清楚，胞浆丰富，胞膜完整，肌纤维间无炎 性细胞。②CVB3病毒感染对照组，第sd心肌组织有炎细胞浸润，感染后 7d—14d心肌组织有大量炎细胞浸润及点片状坏死灶。病变以7d～10d时最显著。 ③黄蔑治疗组自感染后第sd～21d和大青叶治疗组在感染后第sd和7d时，其 心肌组织病变积分较感染对照组明显减轻（P＜0．05）。④山药治疗组在感染 后第 3～ZId及大青叶治疗组感染后第 10d～刀小0肌组织病变积分与感染对照组 比较无差异（PIno．05）。 二 心肌组织电镜检查结果 感染对照组小鼠心肌电镜检查显示线粒体肿胀、蜡断裂、肌浆网扩张、肌 丝溶解、血管内皮细胞肿胀。三组治疗组中上述病变轻，血管内皮细胞无肿胀， 其中以黄蔑治疗组病变最轻，且大青叶治疗组可见大量溶酶体。 三 心肌组织病毒分离结果 四组小鼠接种CVB3后第3d即可分离出病毒，第sd～10d阳性率增加，随 后病毒分离转为阴性。各时间点组间比较无显著性差异（P＞0刀5）。 四 兔疫组化检测结果、常规SABC法检测心肌浸润细胞中PFP抗原表达，结果显示四组小鼠自 CVB3感染后第sd～Zld，其心肌中均可见部分单核浸润细胞的胞浆中有紫蓝色 颗粒（DAB镍加强染色）。其中黄蔑治疗组与感染对照组第 ZId时 PFP抗原表 达阳性率分别为80．0O和40．0O，两者比较有显著性差异（Pwto．05）。空白对 照未见上述PFP抗原阳性细胞浸润。 －2－ 第四军医大学硕士研究生学位论文 一 五 心肌病变积分与病毒分离阳性率的关系 感染对照组、黄蔑治疗组、大青叶治疗组及山药治疗组小鼠心肌组织病变 积分与病毒分离阳性率之间无相关性，其相关系数分别为0．3190、0．1554、 0．3014及 0．2182，P均＞0刀5。 六 心肌病变积分与PFP表达阳性率关系 感染对照组、黄蔑治疗组、大青叶治疗组及山药治疗组小鼠心肌组织病变 积分与nP抗原表达阳性率之间均有相关性，呈正相关，其相关系数分别为 0．8880、0．8867、0．8273及 0．sl 75，P均 ＜ 0．05。 七 心肌组织病毒分离阳性率与PFP表达阳性率关系 感染对照组、黄民治疗组、大青叶治疗组及山药治疗组小鼠心肌组织病毒 分离阳性率与PFP抗原表达阳性率之间无相关性，其相关系数分别为－0刀306。 －0．11 89、0二 604及．0．1075，P均 ＞ 005。 【结论】 黄蔑治疗CVB3引起的VMC有明显疗效，既能显著减少病毒感染后心肌 细胞的破坏及心肌病变程度，又能抑制感染后期PFP介导的CMC作用，从而 缓解心肌的免疫病理损伤。大青叶在感染早朋显著影响心肌组织的病理改变， 这可能与大青叶刺激细胞内溶酶体增多进而减轻病毒本身对心肌细胞的直接 损害有关。本组中药抗CVB3作用中以黄蔑最强。