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目的:本研究拟通过飞秒激光来制作兔角膜内皮植片并利用其切削模式的多样性设计出两种不同的手术方法,定期观察术后植片在自体角膜中的存活状况及根据离体组织实验室检查的结果来评价两种手术模式的可行性及安全性。材料和方法:健康无眼疾新西兰大白兔8只,雌雄兼用,体重2kg-2.5kg,术前分别行裂隙灯显微镜眼前节照相、corvis角膜生物力学分析仪、眼前节OCT及非接触式角膜内皮细胞仪检查后随机分为2组,每组4只,选取右眼为手术眼,A组为模式一(全板层切削+后边切)手术组,B组为模式二(全板层切削+前边切)手术组,分别使用intralase FS150飞秒激光仪按照每种手术模式设定参数值行角膜飞秒激光切削制作角膜内皮植片。术后两周妥布霉素地塞米松眼液常规点眼。分别于术后一周、一个月及三个月行裂隙灯显微镜眼前节照相、眼前节OCT及非接触式角膜内皮细胞仪检查。术后三个月统一耳缘静脉空气栓塞法将兔子处死,取其角膜组织行HE染色组织病理学检查及TUNEL法检测角膜内皮细胞凋亡。结果:1.术前corvis角膜生物力学分析仪所测得的中央角膜厚度与眼前节OCT所测得的中央角膜厚度结果差异无统计学意义(P>0.05)。2.A、B组术后一周、一个月及三个月裂隙灯显微镜眼前节照相可见手术区域角膜透明度良好,无水肿,未见角膜感染等术后并发症。3.A、B组术后一周、一个月及三个月眼前节OCT检查可见角膜内皮植片形态正常完整,植片在位,与周围基质帖附良好,界面光滑,未见植片移位及上皮层间植入等术后并发症;植片厚度与术前设定厚度差异无统计学意义(P>0.05)。4.A、B组术后一周、一个月及三个月非接触式角膜内皮细胞仪检查角膜内皮细胞密度(ECD)、角膜内皮细胞面积变异系数百分比(CV)及角膜内皮六角形细胞百分比(HG)分别与术前比较差异均无统计学意义(P>0.05)。5.A、B组HE染色可见术后角膜内皮细胞形态正常,排列平整呈单线状,其余角组织结构也较完好。6.A、B组TUNEL检测未见阳性细胞,无术后角膜内皮细胞凋亡现象产生。结论:corvis角膜生物力学分析仪与眼前节OCT在测量正常眼中央角膜厚度的结果上具有良好的一致性,可用于飞秒激光术中切削深度参数的设定;两种手术模式术后观察期内的角膜透明度,植片的形态、厚度及稳定性均维持较好,角膜内皮细胞数量、形态及活性较术前未见明显变化,两种手术模式制备内皮植片效果良好,具有可观的应用前景。