宁心红杞胶囊是以民间验方为基础,采用现代科学技术方法从枸杞、红花、山楂等五味植物药材中提取得剑的粗提药,用以治疗围绝经期综合征,经临床应用显示：长期服用,患者血清中E2浓度升高,并基本稳定在较安全范围,可以改善围绝经期综合祉临床症状,无阴道不规则流血现象,且未发现毒副作用。 虽然研究表明宁心红杞胶囊治疗围绝经期综合征确有疗效,但其药效物质基础尚不完全明确,不利于作用机制的深入探究,影响宁心红杞胶囊的进一步临床推广应用。为此,我们拟在整体动物水平上初步验证宁心红杞胶囊药效和初步确认宁心红杞胶囊血中移行成分,为宁心红杞胶囊具体药效物质确认和作用机制深入研究打下基础。 目的：1.初步研究宁心红杞胶囊对围绝经期综合征模型大鼠血清中激素水平和卵巢颗粒细胞形态变化的影响,验证宁心红杞胶囊的药效。 2.初步确认宁心红杞胶囊给围绝经期综合征模型大鼠灌胃给药后的血中移行成分,为进一步研究宁心红杞胶囊的具体药效物质提供基础。 方法：1.采用 kromasil C18色谱柱、乙腈-0.1％磷酸流动相系统梯度洗脱、流速1.0ml/min、柱温30℃、检测波长205nm作为宁心红杞胶囊成分分析的色谱条件,结合建立的宁心红杞胶囊高效液相色谱指纹图谱和其所含部分化学成分的含量,保证实验用宁心红杞胶囊质量一致,减少药物质量不稳定对实验的干扰。 2.取4月龄雌性大鼠为正常对照组,13月龄阴道细胞学表现动情周期延长的雌性人鼠作为围绝经期综合征模型大鼠。模型大鼠随机分为：模型组、宁心红杞胶囊高、中、低剂量组和阳性药物组。灌胃给药8周后,取静脉血用放射免疫法分别检测血清中E2、P、FSH和LH浓度水平,用电镜对给药后各组大鼠卵巢颗粒细胞形态变化进行观察。 3.采用已建立的宁心红杞胶囊成分分析的色谱条件,分析灌胃给予宁心红杞胶囊的模型大鼠血清样品,建立其色谱指纹图谱,初步确认宁心红杞胶囊血中移行成分及其代谢产物。 结果：1.对10个不同批号的宁心红杞胶囊进行分析建立了其色谱指纹图谱,标出 21个共有峰,10批药物色谱图相似度均在0.999以上,实验用各批宁心红杞胶囊所含成分除个别化学成分(RSD％为25.5877％)外,其它各化学成分含量较稳定(RSD％＜5％)。宁心红杞胶囊中金丝桃苷、绿原酸和山奈酚的含量分别为：7.7941±0.1149 mg/g、6.9807±0.0651mg/g和0.9376±0.0070mg/g。 2.与模型组比较：阳性药物组和宁心红杞胶囊中、高剂量组大鼠血中E2、P浓度升高,FSH、LH浓度减低,并有统计学意义(P＜0.05);宁心红杞胶囊低剂量纽大鼠血中E2、P和FSH、LH浓度变化较小,与模型组比较无统计学意义(P＞0.05)。电镜观察各组大鼠卵巢颗粒细胞形态,发现给药组卵巢颗粒细胞超微结构较之模型组有明显差异：颗粒细胞体积增大,细胞核仁明显,常染色质分布为主,胞质中细胞器分布增多,未见凋亡小体。 3.用10个不同批号的宁心红杞胶囊内容物混悬液分别灌饲10只围绝经期综合征模型大鼠,测定大鼠给药后血清样品并建立了色谱指纹图谱,标出18个共有峰,10只大鼠给药后血清色谱图相似度均在0.91以上。通过比较药物、空白血清和给药后含药血清的色谱图,初步确定了宁心红杞胶囊8个入血原型成分和10个代谢成分。 结论：1.本试验建立的宁心红杞胶囊成分分析方法能较全面检测出其所含化学成分,建立的色谱指纹图谱具有代表性,能反映宁心红杞胶囊所含成分的整体特征,实验用各批宁心红杞胶囊质量一致。 2.宁心红杞胶囊能够升高围绝经期综合征模型大鼠血清中E2、P浓度和降低FSH、LH浓度,可以延缓围绝经期综合征模型大鼠卵巢颗粒细胞凋亡。 3.本试验建立的宁心红杞胶囊血中移行成分色谱指纹图谱具有代表性,能够反映宁心红杞胶囊灌胃给药后进入大鼠血液中的化学成分的存在状态,初步明确了宁心红杞胶囊血中移行成分。