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目的：探讨脐带间充质干细胞对急性肝衰竭大鼠的治疗作用，并优化移植治疗途径。方法：采用组织块贴壁法收集hUCMSCs，流式细胞术检测细胞表面标志物。清洁级健康SD大鼠48只（6-8周龄，体重180-220g，雌雄不论），采用完全随机对照法均分为4组：经尾静脉注射移植治疗组，经肝叶注射移植治疗组，模型对照组，空白对照组。急性肝衰竭动物模型采用一次性腹腔注射2.5ml/kg CCL4橄榄油（1：1）混合溶液建立，24h后移植治疗组分别经尾静脉和肝叶注射hUCMSCs细胞悬液；治疗后0h、24h、48h、72h、96h和1w收集血清分析肝功能恢复情况；治疗后3d、1w、2w留取肝脏标本，观察病理学恢复情况，用Real-time PCR检测鼠肝中人CK8、CK18和AFP基因mRNA转录水平，免疫组化法检测人CK18的表达。结果：1、hUCMSCs通过贴壁培养法能成功从脐带中分离并在体外大量扩增，流式细胞仪鉴定符合MSCs表面标志物特性。2、肝功能和肝脏病理学结果显示：移植治疗组肝功能指标TBil和ALT含量较模型对照组有明显恢复（P<0.05），肝细胞再生程度提高，炎细胞减少，肝脏病理学修复作用增强。3、Real-time PCR结果显示：在造模后1w、2w时，经尾静脉移植治疗组和经肝叶注射移植治疗组的肝组织中，CK8、CK18和AFP基因mRNA的相对转录量与模型对照组相比差异有统计学意义（P<0.05），提示转录量明显增加。4、免疫组化结果提示：经肝叶注射移植治疗组和经尾静脉移植治疗组中，移植后的hUCMSCs在鼠肝中诱导分化后表达人肝细胞相关蛋白CK18，随移植时间的延长，分化后的细胞从汇管区向中央静脉区迁移扩散。5、经尾静脉和经肝叶注射移植治疗组的肝功能、移植细胞分化程度比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：1、贴壁培养法能从脐带中成功分离培养出hUCMSCs。2、采用hUCMSCs移植治疗急性肝衰竭大鼠模型后，能促进肝功能和肝脏病理学修复。3、移植后的hUCMSCs自身能分化为具有肝细胞功能的类肝样细胞，表达人肝细胞相关标志物。4、经尾静脉与经肝叶注射移植治疗组疗效相似，且前者更易于应用和推广。