菊花Dendranthema grandiflorum (Ramat) Kitam.原产于中国,是中国十大传统名花之一,也是世界四大切花之首,总产值排名第一。菊花在我国北方秋季园林绿化与美化环境中具有重要的地位,每年的秋天,我国很多城市都会举办菊花展。但是大部分的菊花名品只会在深秋开花,无法满足人类夏季和春节赏花的需求,为了改变这一现状,中国菊花需要培育更多更新的品种,然而传统的育种技术并不能改变这一现状。转基因技术是一种新兴的育种手段,它可以对菊花的花色、花型、花期、光敏感性和抗病虫等方面进行改变,不仅拓宽了菊花育种的途径而且加快菊花的育种进程,对改良和培育新的菊花品种具有重要意义。然而成功的基因转化首先需要建立良好的菊花再生体系,要求一定的不定芽再生率和繁殖系数,且具稳定性和重复性。本试验主要围绕菊花再生体系的建立进行了以下三方面研究：1、菊花高效不定芽再生体系的建立试验最初选择“晚熟红”、“粉菊花”、“黄金球”三个菊花品种建立再生体系,结果表明“粉菊花”和“黄金球”在不定芽再生筛选培养基上再生率低下,褐化严重,所以后期主要以“晚熟红”不定芽再生体系的建立为主。在“晚熟红”的再生体系建立中,利用无菌苗的叶片直接作组织培养的外植体,不仅降低了污染率,而且提高了再生率。在设定的30种不定芽直接诱导培养基上,培养基MS+6-BA0.5 mg/L+NAA2.0 mg/L的不定芽诱导率最高,达到83.3%；而且在一定范围内,不定芽再生率随NAA浓度的升高而升高,随6-BA浓度的升高而降低。在“晚熟红”不定芽的扩繁过程中选择用1／2 MS为基本培养基,腋芽产生植株的个数最多；生根培养基选择用1/2 MS+NAA0.1 mg／L,产生的须根数量多且根比较粗壮。2、菊花试管苗玻璃化现象的逆转研究玻璃化现象是试管苗培养过程中常见的一种现象,它严重影响试管苗的生长和生根培养,必须对其进行防治。玻璃化现象是一种综合影响的结果,试验中的任何一种因素不合适都可能造成玻璃苗的产生。本部分选取七个对玻璃苗产生影响较大的因素,通过改变其含量和状况观察试管苗逆转效果。试验中除了改用暗培养会加重玻璃化现象以外,其他处理或多或少都会改善试管苗的玻璃化现象。其中改变培养基中蔗糖、琼脂和激素等含量都能对玻璃苗产生明显的逆转效果。本试验中增加蔗糖浓度到40g／L、增加琼脂含量为8.5g／L以及降低激素含量为原培养基1／4三个处理的逆转率分别为26.67%、30%、40%,都为同类处理中的最高值。由于产生玻璃化苗原因的复杂性,如能同时改善多种因素可能会达到更好的逆转效果,我们建议预防和逆转应同时进行,以期达到完全消除玻璃化苗的效果。3、菊花品种间的RAPD分析利用RAPD技术对实验室现有的10个菊花品种的遗传多样性和亲缘关系进行分析,通过品种相似性和差异性比较找出10个品种之间的亲缘关系远近,并做出聚类分析。试验结果中10个菊花品种有4个品种出现条带,分别为“晚熟红”、“粉菊花”、“黄鹤楼”和“小白菊”。数据分析采用NTSYS2.0软件分析的方法,从分析结果可以看出,10个品种中“粉菊花”和“小白菊”的亲缘关系最近,其他品种间相似度很差。