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结直肠癌是临床常见的恶性肿瘤之一，根治性切除术后的患者有近半数会复发和转移，而复发和转移是导致患者预后不良和死亡的最主要原因，结直肠癌患者最常见的远处转移器官是肝脏。早期发现和早期治疗这类患者可望延长患者的生存时间，减轻痛苦，提高生存质量。
结直肠癌肝转移是一个多步骤、多因素参与的极其复杂的过程，经过癌细胞从原发癌灶脱离、细胞外基质的破坏、脉管浸润、转移脏器新生血管形成再增殖等过程。在此过程中各自的粘附分子、血管新生因子、细胞外金属基质蛋白酶等多种癌基因出现异常。目前研究认为癌胚抗原（CEA）、抑癌基因nm23、肝细胞生长因子受体（c-met）、基质金属蛋白酶2（mmp2）、环氧化酶2（cox-2）、血管内皮生长因子（VEGF）、表皮生长因子受体（EGFR）及粘附分子CD44等在结直肠癌的侵袭、转移中起着重要的作用。如何从众多的影响因素中筛选出与结直肠癌肝转移联系最为紧密的因素作为预测结直肠癌肝转移的有效指标有着重要的临床意义，也是我们临床医生迫切希望解决的问题。
本研究拟通过对结直肠癌患者临床资料的分析及与结直肠癌肝转移相关生物分子的检测，以期能阐明各种因素与结直肠癌肝转移之间的联系，能够找到较为准确的预测结直肠癌肝转移的方法。因此，我们的实验研究的设计如下：
（1）通过回顾性的病例研究，探讨结直肠癌术后肝转移与相关的临床病理因素之间的联系。
（2）检测CEA、nm23、c-met、mmp2、cox-2、VEGF、EGFR、CD44八种分子生物学指标在结直肠癌中的表达，并用统计学的方法筛选出与结直肠癌肝转移联系最为密切的因子。
（3）联合检测以上实验筛选出的相关因子在结直肠癌中的表达，并进行一系列的诊断试验，对各种诊断试验进行评价，寻找较为理想的结直肠癌肝转移的诊断模型。
第一章影响结直肠癌术后肝转移的临床病理因素分析
目的：结直肠癌肝转移作为最常见的转移途径之一，尚缺乏有效的预测、评估指标，本文即探讨结直肠癌术后肝转移与其临床病理因素之间的关系。
方法：收集行根治性手术治疗的结直肠癌病例700例，其中结直肠癌术后肝转移170例，无肝转移530例，选择性别、年龄、肿瘤直径、分化程度、Dukes分期、淋巴结转移等临床病理因素分组用X2检验进行组间分析。
结果：在诸多临床病理因素中，Dukes分期和淋巴结转移两组中肝转移发生率的差别具有显著性（P<0.05），其中DukesA期肝转移的发生率为17.2％（30/174），DukesB期肝转移的发生率为17.4％（47/270），DukesC期肝转移的发生率为36.3％（93/256），DukesA期、B期与DukesC期之间有统计学差异，DukesC期肝转移发生率较DukesA期、B期高。有淋巴结转移者肝转移的发生率为36.3％（93/256），无淋巴结转移者肝转移发生率为17.3％（77/444）。
结论：肿瘤分期和淋巴结转移是影响结直肠癌肝转移的重要因素。肿瘤病理分期越晚者更易发生肝转移，有淋巴结转移者术后肝转移发生率明显高于无淋巴结转移者。
第二章结直肠癌肝转移免疫组化指标的多因素分析目的：联合检测结直肠癌的多个免疫组化指标，探讨各指标与结直肠癌肝转移的关系。
方法：用免疫组织化学（SP法）检测80例结直肠癌术后的肿瘤组织中CEA、nm23、c-met、mmp2、cox-2、VEGF、EGFR、CD44的表达，X2检验分别分析各指标与结直肠肝转移的关系，Logiatic回归进行多因素分析。
结果：CEA、mmp2、VEGF、EGFR、CD44五项免疫组化指标在肝转移组和无肝转移组的表达有显著性差异（P<0.05）；nm23、c-met、cox-2在两组中表达无显著性差异（P>0.05）。逐步Logistic回归多因素分析（α入=0.10α出=0.15）显示，CEA、VEGF、EGFR三项指标进入模型方程，可解释肝转移发生原因的71.8％（R2=0.718）。
结论：8项免疫组化指标中，CEA、mmp2、VEGF、EGFR、CD44与结直肠癌肝转移相关。CEA、VEGF、EGFR联合检测可作为预测结直肠癌肝转移的有效指标。nm23、c-met、mmp2、cox-2、CD44不适合作为预测结直肠癌肝转移的指标。
第三章联合检测CEA、VEGF和EGFRmRNA表达在结直肠癌肝转移中的意义
目的：术后结直肠癌肝转移的发生率约为20-30％，其中仅10-25％的患者有再次手术切除的机会，为提高再手术切除率，早期预测和诊断结直肠癌术后肝转移就尤为必要。在第二部分研究基础上，进一步探讨CEA，VEGF和EGFRmRNA表达与结直肠癌术后肝转移的关系，评价它们在预测结直肠癌肝转移中的作用以及临床应用的可行性。
方法：RT-PCR法检测90例结直肠癌患者肿瘤标本中CEA、VEGF、EGFRmRNA的表达，以CEA、VEGF、EGFR为指标预测结直肠癌术后肝转移的发生，并以单指标法、平行试验和系列试验评价此诊断试验。
结果：90例行根治术的结直肠癌患者中，根据诊断金标准术后4年内有39例发生肝转移（43.3％）。CEAmRNA表达阳性74例，VEGFmRNA表达阳性67例，EGFRmRNA表达阳性47例。单独以CEA为术后肝转移预测指标诊断实验灵敏度100％，特异度31.4％。单独以VEGF为预测指标诊断实验灵敏度92.3％，特异度39.2％。单独以EGFR为预测指标诊断实验灵敏度87.2％，特异度74.5％。以三指标联合检测平行实验诊断灵敏度100％，特异度9.8％。三指标联合检测系列试验诊断灵敏度94.8％，特异度88.2％。
结论：分别以CEA、VEGF、EGFR单独为结直肠癌术后肝转移预测指标时灵敏度和（或）特异度不全满意，分别为（100％和31.4％，92.3％和39.2％，87.2％和74.5％），因此不适合以单一指标预测结直肠癌术后肝转移的发生。三指标联合检测平行实验时灵敏度和特异度分别为100％和9.8％，特异度有较大降低，因此平行实验不适合用于三指标联合检测预测结直肠癌术后肝转移。系列实验时灵敏度和特异度均较高（94.8％和88.2％），可作为联合检测三指标预测结直肠癌术后肝转移的有效诊断方法。