【摘 要】
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腹泻是生猪养殖产业中的常见疾病,多发于30日龄以内仔猪,每年都会给生猪养殖业带来巨大的经济损失。目前治疗仔猪腹泻的普遍方法仍然是抗生素治疗,但由于耐药性和猪肉抗生素残留问题,抗生素的使用越来越受到限制,而中药由于其绿色环保无残留的特性,在兽医领域的应用逐渐受到重视。因此,研究并开发治疗仔猪腹泻的中药制剂对国家经济发展和食品安全具有重要意义。栀子柏皮汤出自《伤寒论》,是我国的传统方剂,常用于治疗黄疸
【基金项目】
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2018年度省属高校科技成果研发、培育、转化支持计划项目,项目编号:TSTAU-R2018011; 国家自然科学基金资助面上项目(31370764); 黑龙江省自然科学基金重点项目(ZD2015007)
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腹泻是生猪养殖产业中的常见疾病,多发于30日龄以内仔猪,每年都会给生猪养殖业带来巨大的经济损失。目前治疗仔猪腹泻的普遍方法仍然是抗生素治疗,但由于耐药性和猪肉抗生素残留问题,抗生素的使用越来越受到限制,而中药由于其绿色环保无残留的特性,在兽医领域的应用逐渐受到重视。因此,研究并开发治疗仔猪腹泻的中药制剂对国家经济发展和食品安全具有重要意义。栀子柏皮汤出自《伤寒论》,是我国的传统方剂,常用于治疗黄疸,但在治疗腹泻方面的应用却鲜有报道。本文通过测定栀子柏皮汤提取物的最小抑菌浓度,采用正交设计对栀子柏皮汤进行提取工艺优化,确定栀子柏皮汤的抑菌效果;通过建立乳鼠腹泻模型并给药治疗,研究栀子柏皮汤对乳鼠腹泻的治疗效果,并初步应用其治疗仔猪腹泻;通过测定其有效成分对巨噬细胞增殖和吞噬能力的影响,研究其在免疫功能方面的治疗机制;通过建立仔猪腹泻模型并给药治疗,研究课题组前期所筛选出的中药单体配比制剂(命名为黄秦仔泻宁)对仔猪腹泻的临床应用效果。本文首先使用正交设计法,通过考察栀子柏皮汤提取物的最小抑菌浓度优化栀子柏皮汤的乙醇回流提取工艺,得到最佳提取工艺为:提取温度80℃,提取次数2次,乙醇体积分数60%,料液比1:12,提取时间1h。在此条件下,栀子柏皮汤的最小抑菌浓度MIC90可达6.25mg/m L,提取率为25.9%。通过体内实验研究栀子柏皮汤提取物对乳鼠ST肠毒素腹泻模型的治疗效果,结果表明,栀子柏皮汤提取物可有效治疗乳鼠腹泻,最佳给药剂量为2g/kg,而给药剂量为4g/kg的高剂量组治疗效果较弱,推测可能是栀子柏皮汤提取物中含有有毒杂质所致;使用最佳给药剂量治疗不同程度腹泻,发现其对轻、中度模型具有明显的治疗效果,说明栀子柏皮汤提取物可能通过降低ST肠毒素活性或修复由ST肠毒素导致的代谢紊乱,抑制肠积液的产生,治疗腹泻;使用栀子柏皮汤提取物初步治疗仔猪腹泻,结果表明,栀子柏皮汤提取物给药能一定程度上改善仔猪腹泻症状,且与恩诺沙星合用后能缩短恩诺沙星的治疗周期。通过研究栀子柏皮汤有效成分对巨噬细胞增殖和吞噬能力的影响,探讨栀子柏皮汤有效成分治疗腹泻在免疫功能方面的机制。结果表明,栀子苷、西红花苷-I、甘草苷可增强巨噬细胞的吞噬能力,说明栀子柏皮汤有效成分可能通过增强巨噬细胞活性,调节机体的特异性免疫和非特异性免疫功能治疗仔猪腹泻。通过建立仔猪大肠杆菌腹泻模型,并使用不同浓度配比制剂对其进行治疗,以粪便计分为指标,评估课题组前期工作筛选出的黄秦仔泻宁制剂治疗仔猪腹泻的临床应用效果。结果表明,黄秦仔泻宁能有效治疗ST肠毒素导致的仔猪腹泻,有效率为100%,死亡率为0%;中剂量给药组治愈率为100%,优于其他各组;高剂量给药组治愈率为33.3%,效果较差。说明该单体配比给药剂量与治疗效果不呈浓度依赖性,给药剂量为6mg/kg时效果最好。
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