原发性肝癌是一种常见的恶性肿瘤，其中肝细胞性肝癌占80-90％，其预后受很多因素的影响。近年来，肝癌的手术并发症和死亡率已显著降低。但是术后较高的转移复发率是目前影响远期疗效的主要因素。如何预测及预防肝癌的复发是当前肝癌研究的热点和难题。 研究表明，肿瘤的浸润和转移是一个复杂的过程：第一步，肿瘤细胞与基底膜表面的整合素受体及非整合素受体相结合；第二步，破坏由细胞间基质和基底膜组成的细胞外基质；第三步，穿过细胞外基质破坏处进入局部淋巴系统及毛细血管，在远隔部位突破毛细管结构，形成新的转移灶。 细胞外基质(extracellular matrix．ECM)是细胞生存的重要内环境，主要由间质胶原蛋白、层粘连蛋白、弹性蛋白、纤维粘连蛋白、硫肝素蛋白多糖组成，同时含有大量的蛋白酶、细胞因子和粘附因子。ECM处在不断代谢更新、降解重塑的动态平衡中，可维持细胞生长的微环境，并可调节与其接触的肿瘤细胞的基因表达，从而影响肿瘤的代谢、生长及转移。 浙江大学硕士学位论文 肿瘤细胞与ECM的相互作用在肿瘤的浸润与转移过程的各个阶段均存在，肿瘤细胞的浸润与转移首先须发生基底膜的降解，基底膜的降解意味着肿瘤的浸润与转移。而在良性疾病中，基底膜总是完整的。 由此可见·ECM，尤其是其中的基］氏膜（basement membrane．BM），是肿瘤浸润和转移过程中必须克服的生理屏障。 肿瘤细胞从原发灶脱离形成转移灶的过程中，需要反夏降解ECM及BM构成的自然屏障，因此降解ECM和BM的蛋白水解酶与肝癌的转移密切相关。大量研究证实基质金属蛋白酶（matrix””tallonrotelnase，MMP）是降解 ECM最重要的酶类。 MMP目前己发现了十几种，但研究较多且与肿瘤浸润和转移关系密切的主要是明胶酶（gelatinase）。 明胶酶又称＊型胶原酶，主要分成两类：明胶酶 A（MMPZ），即 72KDa IV型胶原酶；明胶酶 B（MMP．9），即 95KDa IV型胶原酶cMMP－2，MMP－9由于能降解BM的主要成分－IV型胶原，被认为在肿瘤的转移中发挥重要的作用。 大肠癌、乳癌、胰腺癌及卵巢癌中，MMP的研究较多，而有关肝细胞性肝癌，MMP的原位表达及在浸润和转移中的作用的研究较少。我们利用免疫组化SP法检测MMPZ、MMPg在41例肝细胞性肝癌组织、癌旁肝组织和10例健康肝组织中的表达，并观察它们与肝细胞性肿癌临床病理参数之间的关系，旨在揭示MMPZ、MMP－9在肝细胞性肝届浸润和转移发生的意义，并为］旧床判断预后及治疗提供新的思路和手段。 2 浙江大学硕士学位论文 材料和方法 41 例肝细胞性肝癌取自浙江大学医学院附属邵逸夫医院自2000年l月至2002年3月间手术切除的标本，分别取肝癌组织，癌旁肝组织，迭本院中心实验室－70℃保存备用。术后切除标本病理证实为肝细胞性肝癌。另10例健康肝组织由非肝胆手术术中肝脏边缘，以作对照。采用免疫组化SI法检测MMPZ、MMPg的表达，一抗工作浓度均为1：l，设立阳性和阴性对照。阳性判断和分级标准：MMPZ、MMPg均以细胞胞膜、胞浆出现棕黄色作为阳性细胞，按阳性细胞所占的比例低于5％为阴性表达（一），超过5％为阳性表达（＋）。统计学处理：大样本资料采用X’检验，小样本资料采用确切概率法。 结 果 41例肝细胞性肝癌病例中男34例，女7例，年龄33－74岁，平均538岁，其中）50岁者22例：HBSAg阳性18例；丙种肝炎抗体 （N＊VA b） 阳性5例：伴有肝硬化者Z4例：有假包膜形成者25例，其中假包膜浸润9例；血管侵犯者6例；假包膜浸润和血管侵犯均有者2例。MMPZ、MMPg在健康肝组织肝细胞和癌旁肝组织未见阳性表达，胆管上皮中偶见散在的阳性染色细胞。41 例肝细胞性肝癌中MMPZ阳性表达者17例，阳性率为413％，较癌旁肝组织表达率高，具有显著差异（p＜001）。肿瘤细胞中＊＊卜2主要定位于胞浆，周围间质中未见着色。41例肝细胞性肝癌中MMPg阳性表达者19例，阳性率为463％，较癌旁肝组织表达率高，具有显著差异（p＜001）。肿瘤细胞中MM卜9主要定位于胞浆，肿瘤组织周围间质中见炎症细胞、 3 浙江大学硕土学位论文纤维细胞着色。 肝细胞性肝癌中MMPZ、MMPg的表达与思者性别、年龄、HBSAg阳性、HCVAb阴性、肿瘤大小、伴肝硬化与否、有无血管侵犯均无相关性（pTh005），其中有血管侵犯组MMPZ、MMP－9的表达率（667％，83．3o）高于无血管侵犯组（371o，40o），但差异不显著。MMP－2、MMP－9的表达与肿瘤有无假包膜浸润有关，有假包膜浸润组的阳性率明显高干无假包膜浸润组，两者相比有显著差异（p?