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课题一 遗传病基因诊断新技术及中国人乙型血友病基因诊断的研究 遗传病的基因诊断和产前诊断对阻断遗传病的逐代传递，提高人口素质具有重要意义。本研究首先建立了两项适合大量样品未知基因突变筛查的新技术——循环双脱氧指纹图谱法(Cycle-ddF)和荧光指纹图谱法(FF)。Cycle-ddF将循环测序反应和SSCP电泳技术的优点结合在一起，与原来的双脱氧指纹图谱法(ddF)相比，省去了T7 RNA聚合酶转录和AMV逆转录两步反应，避免了RNA操作，简化了步骤，降低了成本并保持了原ddF阳性检出率高及快速直观的特点。荧光指纹图谱法(FF)是我们首先发现DNA突变筛查新思路，利用ABI 373 DNA测序仪的荧光检测系统和数据收集处理系统，精确建立了样品DNA的荧光指纹图谱，该图谱包含了所有样品DNA序列的所有原始信息，在大量样品的基因突变筛查时可以同时准确灵敏、直观高效地检出所有样品中的突变。较自动测序仪检测DNA突变原来的程序，大大简化了操作，节省了时间，提高了工效。 以此两项技术为核心，我们建立了乙型血友病基因诊断技术新体系。十三个中国人重型乙型血友病家系的FIX基因突变被检出，共发现2例单碱基缺失，1例两碱基缺失，1例三碱基缺失和7例单碱基替换。其中6例为国内外首次报道的新突变类型。本文从分子水平上对这十三例重型血友病的发病机理进行了详细探讨，并以FIX基因为报告基因就中国人胚系突变模式的热点问题进行了讨论。_ 课题二 苯丙氨酸脱氨酶cDNA在乳酸乳球菌中的克隆表达及其在经典型苯丙酮尿症基因治疗新途径探索中的初步应用 经典型苯丙酮尿症(Classical PKU)是一种先天性苯丙氨酸代谢缺陷病，属常染色体隐性遗传，由笨丙氨酸羟化酶(PAH)基因突