【摘 要】
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目的:本文通过分子生物实验技术,将LIF因子转染于骨髓间充质干细胞,探讨鹿茸多肽(Pilose antler polypeptides,PAP)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMS
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目的:本文通过分子生物实验技术,将LIF因子转染于骨髓间充质干细胞,探讨鹿茸多肽(Pilose antler polypeptides,PAP)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、分化及抗氧化方面的影响并对大鼠骨髓间充质干细胞进行提取、培养及鉴定,观察LIF因子对骨髓间充质干细胞的作用影响,从而为鹿茸多肽及骨髓间充质干细胞更好的应用于脊髓损伤提供了理论依据。方法:将大鼠进行手术造模,分离骨髓间充质干细胞,对BMSCs进行培养及鉴定,通过实验,我们在光学显微镜观察了分离后BMSCs的细胞形态,将BMSCs进行传代培养,绘制BMSCs生长曲线,利用BMSCs的表面抗原标记物(CD34,CD44,CD90)对其鉴定,结果证实实验分离得到细胞为大鼠BMSCs。按照试剂盒说明书,将LIF基因转染于大鼠骨髓间充质干细胞,获得了稳定转染表达LIF的BMSCs,通过MTT比色,检测SOD、MDA活性,细胞信号通路检测及免疫组化检测,观察鹿茸多肽对骨髓间充质干细胞的作用影响。结果:本实验成功分离、培养并鉴定了大鼠BMSCs;研究发现,鹿茸多肽可以提高细胞活力,但是转染LIF基因后,细胞活力显著降低,鹿茸多肽也无法升高其细胞活力,说明鹿茸多肽促进骨髓间充质干细胞活力的影响可能是通过LIF基因发挥作用了;鹿茸多肽通过对SOD、MDA的调节,实现其对细胞的抗氧化作用,且这些作用可能是通过LIF基因实现的;鹿茸多肽可以促进大鼠BMSCs的增殖、分化,转染LIF基因后的骨髓间充质干细胞加入鹿茸多肽后,未影响骨髓间充质干细胞的增殖、分化。结论:(1)鹿茸多肽可以提高骨髓间充质干细胞的细胞活力。(2)鹿茸多肽可以提高骨髓间充质干细胞的抗氧化应激活性。(3)鹿茸多肽可以提高使骨髓间充质干细胞的抗炎活性。(4)将LIF因子转染于骨髓间充质干细胞,鹿茸多肽未影响骨髓间充质干细胞的增殖、分化,所以考虑可以将转染LIF因子的骨髓间充质干细胞作为细胞移植的载体。
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