梭子蟹(Portunus trituberculatus)隶属于甲壳纲(Crustacea)、十足目(Decapoda)、梭子蟹科(Portunidae)、梭子蟹属（Portunus），是浙江省海洋水产养殖主要品种之一。为了进一步搞清养殖梭子蟹乳化病的病原及其致病机理，找到有效的防治方法，本文以典型症状的病蟹作为材料，通过菌株的分离鉴定、人工感染试验、病理组织观察等手段，对梭子蟹乳化病的病原进行了研究，并且采用血液生理生化指标、ELISA 、免疫荧光和UPPCR-SSCP等技术对梭子蟹乳化病进行诊断，以期为梭子蟹乳化病的早期诊断及防治提供科学依据。 2002～2004年在浙江省宁波、舟山等地养殖场，从濒死的梭子蟹体内分离到两株菌分别为1205－11和1205－21。通过菌体形态、培养特性和生理生化反应，鉴定这两株菌分别为溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）和葡萄牙假丝酵母(Candida lusitaniae)。人工感染证实：这两株菌是梭子蟹乳化病的病原菌，溶藻弧菌是主要病原菌，葡萄牙假丝酵母为继发性感染，蟹体的损伤部位是传播的主要途径。 对患乳化病的梭子蟹进行了血液生化指标检测。结果表明，与健康梭子蟹相比：肌酐、总胆固醇、钠、氯、镁和钙等指标明显上升，而血糖、总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶等指标却显著下降。通过人工感染试验的追踪检测，并与对照组相比，感染后24h发生明显变化的血液生化指标为血糖、总胆固醇、总蛋白、谷草转氨酶和镁，此五种指标可作为梭子蟹乳化病的早期诊断指标。 以梭子蟹乳化病的病原菌――溶藻弧菌为抗原，制成免疫血清，利用辣根过氧化酶标记的羊抗兔血清（HRP-IgG）为酶标二抗，建立了检测溶藻弧菌的间接ELISA快速诊断法。结果表明，应用间接ELISA技术检测溶藻弧菌有较高的灵敏度，最低的检测量为1×104cfu/mL。同时交叉反应表明其具有较高的特异性。人工感染48h后，就能在血淋巴和鳃中检测到溶藻弧菌。应用建立的间接ELISA法进行现场检测，表观有病蟹的阳性检出率为90﹪，表观健康蟹的阳性检出率为20﹪，养殖海水中没有阳性检出。 以梭子蟹乳化病的病原菌――溶藻弧菌为抗原，制血兔抗血清，利用异硫氰酸荧光素标记的羊抗兔血清建立了梭子蟹乳化病的间接荧光抗体快速诊断法。结果表明，应用间接荧光抗体技术检测溶藻弧菌有较高的灵敏度，最低的检测量为1×105cfu/mL。同时交叉反应表明其具有较高的特异性。人工感染试验24h后，就能在鳃和血淋巴中检测到溶藻弧菌。应用建立的间接荧光抗体技术进行现场检测，表观有病蟹的阳性检出率为90﹪以上，表观健康蟹的阳性率检出率为20﹪，养殖海水中没有阳性检出，与ELISA检测结果大致相同。 采用通用引物PCR配合SSCP分析即UPPCR-SSCP技术，研究快速检测梭子蟹乳化病病原菌的分子生物学诊断技术。结果发现，采用通用引物，溶藻弧菌可以和嗜水气单胞菌、铜绿假单胞菌、创伤弧菌、河流弧菌等部分常见水产病原菌区分开来，这样可以建立一种针对于梭子蟹乳化病致病菌的UPPCR-PCR检测技术。UPPCR-SSCP技术能快速简便地检测并鉴别上述病原菌，此研究对水产养殖病原菌的快速诊断与及时防治有重要意义。