【摘 要】
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肌细胞分化与动物肉质相关,也与人类的一系列疾病,如心脏病,肌肉萎缩等相关。Adipose (adp)基因编码一种在进化上保守的蛋白质,在组织中广谱表达。该基因最初在肥胖果蝇突变
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肌细胞分化与动物肉质相关,也与人类的一系列疾病,如心脏病,肌肉萎缩等相关。Adipose (adp)基因编码一种在进化上保守的蛋白质,在组织中广谱表达。该基因最初在肥胖果蝇突变体中发现,Adp突变果蝇高效储存脂肪,在饥饿条件下可增加果蝇存活率高,但目前对其功能了解甚少。本文以C2C12成肌细胞为模型,构建了C2C12稳转表达ADP的细胞系,采用RT-PCR、Western Blot以及免疫细胞染色等方法,较系统的研究ADP对C2C12成肌分化的影响以及脂肪细胞因子TNF-α对ADP介导的C2C12成肌分化的调控作用。获得如下研究结果:1.ADP表达量随C2C12的成肌分化呈上升态。2.稳转表达ADP细胞系分化时间提前,分化程度更高,成肌标志因子MHC的mRNA和蛋白表达量明显高于对照,表明ADP可以促进C2C12成肌分化。3.检测稳转表达ADP细胞系分化过程中成肌相关因子Myf5, MyoD1, MyoG, Mef2c表达变化发现,只有MyoG在稳转表达ADP细胞系中的表达明显高于对照组。C2C12细胞中超表达ADP和敲减ADP后,MyoG表达量呈显著变化。证明ADP可能是通过MyoG介导促进C2C12的成肌分化。4. TNF-α刺激稳转表达ADP细胞系,分化2天后检测显示:TNF-α刺激后显著地降低了MHC、ADP及KLF15的表达量,免疫细胞染色也显示TNF-α显著地降低了肌管数量。结果证明脂肪细胞因子TNF-α可抑制ADP对C2C12分化的促进作用。
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