MicroRNA-424对肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭力的影响

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1、背景和目的MiRNAs是一类由内源基因编码的非编码单链RNA分子,其在转录后水平的基因表达往往起着负性调控作用。大量研究显示,miRNAs在肿瘤中存在差异性表达,具有类似癌基因和抑癌基因的作用,明确其机制有可能会找到一种新型有效的肿瘤诊断和治疗方法。已有研究表明,mir-424在肝癌组织中的表达明显低于非癌肝组织,因此,我们通过mir-424瞬时转染人肝癌细胞系MHCC97-H和MHCC97-L,验证其对细胞增殖、细胞迁移和细胞侵袭能力的影响。初步探索mir-424在肝癌细胞中的作用,为进一步研究mir-424的作用机制奠定基础。2、方法利用实时定量RT-PCR检测肝癌细胞系MHCC97-H、MHCC97-L和正常肝细胞系HL-7702中mir-424的表达,然后用化学合成的mir-424mimics分别瞬时转染至肝癌细胞系MHCC97-H和MHCC97-L中,用荧光定量RT-PCR验证其在各种细胞系中的过表达。最后通过MTT实验检测细胞的增殖,transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。3、结果1)、与正常肝细胞HL-7702相比,mir-424在肝癌细胞MHCC97-H和MHCC97-L中明显低表达;2)、实时荧光定量PCR表明,经过转染,mir-424在肝癌细胞MHCC97-H和MHCC97-L中明显过表达;3)、MTT实验证实,过表达mir-424的肝癌细胞MHCC97-H和MHCC97-L与他们的阴性对照组相比,生长速度减慢,增殖受到抑制;4)、ranswe ll实验证明了过表达mir-424的肝癌细胞MHCC97-H口MHCC97-L迁移和侵袭能力受到明显抑制。4、结论在体外实验表明,通过转染技术使mir-424在肝癌细胞系MHCC97-H和MHCC97-L中过表达能够抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
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