MBD2在血液恶性疾病中的表达及苦参碱对其影响

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目的:表观遗传学调控变化在疾病发生和肿瘤的形成和发展中扮演着重要角色,DNA甲基化是表观遗传学研究的重要领域。DNA甲基化与DNA去甲基化修饰调控形成机体生长发育过程中特异性的甲基化谱,甲基化谱的改变则可能导致机体疾病或肿瘤的发生,而解读关于机体形成的甲基化谱这套密码的蛋白质之中,甲基化 CpG结合蛋白家族是目前研究较多的关于 DNA甲基化的“甲基化阅读器”,其能有效识别 DNA的甲基化修饰并对甲基化信息进行解读。甲基化CpG结合蛋白2(MBD2)作为甲基化CpG结合蛋白家族成员之一,因为敲除后的小鼠并不是胚胎致死性的,仅影响成年后小鼠的哺乳行为,故被认为是一个极度具有研究和应用前景的靶点。其在血液系统肿瘤的临床病人中关于MBD2的表达情况以及寻找能调控 MBD2表达的药物研究甚少,故在此我们进行了血液系统恶性肿瘤临床标本的收集与检测并初步探究了苦参碱对于MBD2表达的影响。  方法:⑴收集200例初诊的血液系统恶性肿瘤病人骨髓标本,采用Real-time PCR的方法检测甲基化CpG结合蛋白2(MBD2)在mRNA水平的表达情况并进行统计学分析。⑵采用CCK8方法检测苦参碱对Burkitt淋巴瘤细胞系Duadi增殖的影响,采用流式凋亡检测其是否能诱导该细胞系的凋亡,采用Real-time PCR的方法检测苦参碱药物作用后甲基化CpG结合蛋白2(MBD2)在mRNA水平的表达变化情况。  结果:①收集的临床标本检测显示AML,MDS和CML患者MBD2表达较正常对照组升高,但无统计学意义。而ALL表达MBD2相对于正常对照组升高,且具有统计学意义。其中,以 B系和预后差组明显升高。将病人的基本特征进行分析发现,年龄和高白细胞特征与 MBD2表达关系不大,性别特征中女性病人 MBD2表达升高,ALL预后不良分子生物学(BCR/ABL,MLL/AF4融合基因阳性)显示出更高的MBD2水平,OS,DFS未显示出明显差异。②在ALL中进一步检测发现,MBD2的表达水平上调,WNT通路活性上调。但T系急性淋巴细胞白血病MBD2表达上调无明显统计学意义,B系急性淋巴细胞白血病MBD2表达上调有统计学意义。③苦参碱可以抑制Burkitt淋巴瘤细胞系Duadi的增殖和诱导其凋亡,可轻度下调MBD2的表达。  结论:⑴MBD2在B-ALL和预后差组ALL中表达升高,OS,DFS未发现明显差异。它可能成为一个在ALL中潜在的提示预后不良的指标。在B-ALL中MBD2和WNT通路的上调,或许是一个ALL治疗的潜在的靶点。⑵苦参碱可以抑制B系淋巴瘤Duadi的增殖和诱导凋亡,可轻度下调MBD2的表达,或许可以成为一个作用于MBD2的药物。
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