【摘 要】
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T细胞与其他免疫细胞的互作需要其表面的共分子辅助,而目前对鱼类T细胞共分子的研究较少。本文鉴定了斜带石斑鱼T细胞3种重要的共分子,并分析了其在两种重要的病原——刺激隐核虫和溶藻弧菌感染后的表达差异,旨在为进一步揭示T细胞抗病机制提供数据参考。本论文获得的具体结果如下:1.克隆获得石斑鱼Ec CD2、Ec CD27和Ec CD28基因的完整ORF序列,分别为1014bp、681 bp和678 bp,
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T细胞与其他免疫细胞的互作需要其表面的共分子辅助,而目前对鱼类T细胞共分子的研究较少。本文鉴定了斜带石斑鱼T细胞3种重要的共分子,并分析了其在两种重要的病原——刺激隐核虫和溶藻弧菌感染后的表达差异,旨在为进一步揭示T细胞抗病机制提供数据参考。本论文获得的具体结果如下:1.克隆获得石斑鱼Ec CD2、Ec CD27和Ec CD28基因的完整ORF序列,分别为1014bp、681 bp和678 bp,编码337、226和225个氨基酸;同源比对分析发现Ec CD2、Ec CD27和Ec CD28与其他物种相应共分子氨基酸序列相似度分别为20%-75%、35%-53%和24%-48%;结构分析发现Ec CD2胞外区包含与哺乳动物类似的两个Ig结构域、Ec CD27含1个肿瘤坏死因子受体超家族结构域、Ec CD28存在1个Ig结构域;进化树分析显示CD2、CD27和CD28分子各自聚为两支:哺乳动物分支和鱼类分支,说明这三种共分子在脊椎动物进化过程中是保守的。2.组织分布结果显示Ec CD2、Ec CD27和Ec CD28在检测的健康石斑鱼6个组织中均有表达,但在胸腺和鳃等部位表达量相对较高,暗示三者在系统免疫应答及黏膜免疫应答中均可能发挥作用。3.刺激隐核虫感染可引起Ec CD27在脾脏中的表达量剧烈上升,Ec CD2则在感染后的脾脏主要为下调表达,未在感染后的脾脏中发现Ec CD28显著的表达差异;刺激隐核虫感染后1 d的鳃组织中Ec CD2和Ec CD28的表达量上调,而Ec CD27在感染后的鳃中未发现显著的表达差异。4.溶藻弧菌感染后多个时间点的脾脏和头肾中均发现Ec CD27显著上调;Ec CD2在溶藻弧菌感染后的脾脏中逐步上调表达,并在感染后48 h时的相对表达量达到最高,头肾中也同样发现Ec CD2的上调表达;溶藻弧菌感染后的头肾中,Ec CD28的表达量显著升高,而脾脏中的表达量仅在24 h时出现显著升高。
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