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黄酮类化合物广泛存在于药用植物中,已用于治疗多种慢性疾病,如高血压、糖尿病及动脉粥硬化等。目前就黄酮类成分的有效提取研究,以解决其提取过程中费用昂贵、操作复杂、耗时、耗剂等问题为关键所在。为此,探索一条绿色环保、高效、经济的方法是非常重要的,故本研究以富含黄酮类化合物的葛根、黄芪、槐花、黄芩作为模式饮片进行了探索性研究。对影响黄酮提取效率的提取时间、提取溶剂、料液比和功率等因素运用单因素结合Box-Behnken响应面设计法(BBD-RSM)进行筛选,确定最佳的红外提取工艺,并采用超高效液相色谱(UPLC)法建立快速同步测定饮片中多种黄酮类成分含量的方法。最终由红外辅助法、超声法、回流法测定不同饮片中总黄酮含量,结合氧自由基吸收能力(ORAC)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)来评价红外法和传统法的优劣,通过总黄酮含量与抗氧化活性更加全面、可靠筛选了提取工艺。研究结果如下:(1)UPLC定量方法的建立采用UPLC对中药材的流动相、色谱条件及方法学进行研究。根据饮片中多种黄酮类成分的性质,筛选出分离度好、出峰时间快、峰型与峰面积好的甲酸,乙腈流动相梯度与最佳的柱温、检测波长、流速等色谱条件。并结合方法学的考察结果建立了四种饮片定量分析方法。各考察结果均达到标准要求,且仪器性能良好,红外辅助方法稳定可靠,各项结果表明可进行各饮片的有效成分含量测定和进一步研究。(2)红外辅助和传统提取研究运用红外辅助法对各饮片一的料液比,提取时间,提取功率等进行单因素筛选,并通过BBD-响应面法对影响大的因素进行进一步优化,最终得红外辅助提取总黄酮最佳提取工艺。最佳条件下各药材总黄酮含量分别为:黄芪的总黄酮含量为0.575mg/g,葛根的总黄酮含量为34.61mg/g,槐花的总黄酮的含量为33.199mg/g,黄芩的总黄酮的含量为174.794mg/g。同时以传统提取法(超声提取,回流提取)提取各饮片中总黄酮含量,其分别对应的最高含量分别为1.142,40.73,30.217,182.695mg/g,由结果显示,表明不同提取方法除黄芪外其含量相差较少,黄芪传统提取法含量约为红外的2倍。(3)抗氧化活性研究分别测定各饮片的ORAC值与DPPH值,在最佳红外辅助提取条件下,黄芪、葛根、槐花、黄芩的抗氧能力ORAC值分别为:6576.203±553、5824.016±575、3785.827±518、1603.197±78μmoL/g,清除活性DPPH值分别为110.83、32.50、53.44、88.49μg/mL。传统提取方法对应的最高ORAC值分别为:3428.050±391、3362.656±284、2983.864±232、2300.137±78μmo L/g,DPPH值:84.13,64.33,70.2,74.46μg/m L。由结果知,红外辅助提取的氧化活性整体强于传统提取方法,且黄芪红外提取的氧化活性是传统的2倍。本实验建立了以UPLC同时测定多种黄酮类的定量分析方法,并通过活性研究表明四种饮片的不同提取方法均有一定活性。以上研究结果表明红外辅助提取的效率高于传统提取,在含量与活性研究上,其整体优于传统,具有高效、经济、环保、绿色等特点,可用于之后提取工艺的研究。且通过含量与活性研究可知,采用这两种方法共同评价提取方法更加合理客观,避免了单方面片面的评价,使红外辅助法更好的用于研究。本实验可为之后红外辅助提取黄酮类成分,含量和活性研究奠定基础。