背景与目的　　糖尿病是严重威胁人类健康的慢性代谢性疾病，也是我国重要的公共卫生问题之一。本研究拟通过高通量测序技术检测血液细菌16S rDNA V6-V7可变区序列分析糖尿病及正常人的血液细菌分布情况，并进一步探讨血液微生物组学与糖尿病之间的相关性，为研究糖尿病的预防和控制提供新思路。　　材料与方法　　1.研究对象和数据收集：研究对象来源于以社区人群为基础的苏州市“135”队列研究。自2013年6月至2014年9月，采用整群抽样方法抽取6000名居民进行问卷调查和体格检查，收集基线研究对象的人口统计学资料和人体测量资料等。2015年6月至2016年9月进行第一次随访，共有108名新发糖尿病患者。采用随机抽样方法抽取50例新发糖尿病患者，按年龄、性别因素1:2匹配100名非糖尿病人群为对照，收集研究对象的基线资料，采用巢式病例对照研究方法进行分析。　　2.实验室检测：收集研究对象2013年基线的空腹静脉血，低温运送至实验室，采用Hitachi7020全自动生化分析仪检测相关生化指标。提取血浆样本中的总核酸， PCR扩增细菌16S rDNA V6-V7可变区并进行高通量测序。　　3.数据分析：采用Qiime（version 1.7.0）和Mothur（version 1.31.2）软件进行高通量测序数据的生物信息学分析。采用 Ep ida ta3.0 建立数据库，采用 SAS9.2、SPSS21.0和Medca lcV1.0.0进行数据的统计分析。正态分布的连续性变量采用均数±标准差表示，两组间比较采用t检验；偏态分布的连续性变量采用中位数和四分位数间距表示，两组间比较采用Mann-Whitney U检验。分类变量采用率（%）表示，两组间比较采用卡方检验或Fisher确切概率法。采用Mann-Whitney U检验比较糖尿病组与对照组各细菌相对丰度的差异，采用Spearman相关对糖尿病与细菌丰度及各基线变量进行相关分析，采用Medcalc V1.0.0软件进行ROC曲线的绘制和比较。所有分析均采用双侧检验，检验水准为0.05。　　研究结果　　1.本研究共纳入150名研究对象，糖尿病组50人，对照组100人。基线特征比较显示，糖尿病组中BMI、WC、SBP、DBP、ALT、TC和TG水平显著高于对照组，而HDL水平显著低于对照组，差异均有统计学意义。　　2.本次高通量测序共收集9968238条原始序列，经过滤后得到最终用于后续分析的优质序列共9244618条，占总序列数的92.74%。其中糖尿病组共收集原始序列3253506条，优质序列3000391条；对照组共收集原始序列6714732条，优质序列6244227条。　　3.本次测序共聚类到453个OTU，注释到17个门、29个纲、51个目、123个科和284个属。Alpha多样性结果显示，糖尿病组和对照组的Chao指数、Shannon指数和 S imp so n 指数均无统计学差异。群落组成情况显示，在门、纲、目、科和属水平上，糖尿病组和对照组人群优势菌的组成均无显著差异。　　4.糖尿病组和对照组在门、纲和目水平上主要细菌的相对丰度无统计学差异。但在科水平上，糖尿病组中 Burkholderiales_incertae_sedis 菌科的相对丰度低于对照组（P=0.024）；属水平上，糖尿病组中Aquabacterium水杆菌属的相对丰度低于对照组（P=0.024）。　　5.糖尿病组中 Actinotalea 菌属、Pseudoclavibacter 刺黄色假杆菌属和Sediminibacterium土壤杆菌属的检出率高于对照组，而Pseudonocardia假诺卡氏菌属、Bacteroides拟杆菌属、Afipia阿菲波菌属和Xanthomonas黄杆菌属的检出率均低于对照组，差异均有统计学意义。　　6.属水平上，共筛选出 7 种菌属与糖尿病之间存在相关性，其中 Actinotalea菌属、Pseudoclavibacter刺黄色假杆菌属、Sediminibacterium土壤杆菌属、Ensifer剑菌属和Alishewanella另类希灭氏菌属与糖尿病之间呈正相关，而Pseudonocardia假诺卡氏菌属和Xanthomo nas黄杆菌属与糖尿病之间呈负相关。　　7.在 7 种与糖尿病相关的菌属中，Xanthomonas 黄杆菌属预测糖尿病的 ROC曲线下面积最大，为0.627，灵敏度和特异度分别为45%和82%；将各相关性菌属联合做ROC曲线，曲线下面积为0.731，灵敏度和特异度分别为86%和52%。此外，采用传统危险因素预测糖尿病的 ROC 曲线下面积为 0.759，灵敏度和特异度分别为70%和74%，采用传统危险因素+相关性菌属预测糖尿病的ROC曲线下面积为0.818，灵敏度和特异度分别为72%和80%。　　研究结论　　1.糖尿病患者血浆Burkholderiales_incertae_sedis菌科和Aquabacterium水杆菌属的相对丰度显著低于对照组。此外，在糖尿病患者和非糖尿病人群中，Actinotalea菌属等7种菌属在两组间的检出率存在差异，Pseudoc la vibac ter刺黄色假杆菌属等7种菌属与糖尿病显著相关。　　2. Xanthomonas 黄杆菌属单独作为标志物预测糖尿病明显优于其他相关性菌属，各相关性菌属联合预测糖尿病明显优于单个菌属。此外，采用传统危险因素+相关性菌属联合预测糖尿病优于传统危险因素。