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大量研究表明,天然产物是极为重要的新药开发来源,特别在抗肿瘤、抗菌等领域具有无可替代的主导地位。随着对普通环境下微生物代谢产物的大量研究,从其中获得新结构活性化合物的难度越来越大。因而,研究者们的目光转向了极端环境下的微生物资源。微生物为了在极端的温度、盐分、压力及pH等环境下生存,建立了独特的防御机制,形成特殊的基因构成、代谢机制及细胞结构。因而,极端环境中生长的微生物在代谢途径及代谢产物具有一定特殊性,为开发新型活性化合物带来希望。 本文研究的真菌分离自云南锡业股份有限公司大屯选矿厂锡尾矿库土壤,此土壤是一种重金属污染的弱碱性环境,属于一个“人造”的极端环境。先对经初筛的12株真菌进行10L液体发酵,将发酵提取物进行TLC薄层色谱点板及HPLC高效液相色谱分析,筛选出代谢产物丰富且可能产生新颖结构代谢产物的目标菌株YIMDT10058,YIMDT10072及YIMDT10112。之后进行放大发酵,YIMDT10058发酵180L,YIM DT10072发酵40L,YIMDT10112发酵30L。得到发酵液提取物后,采用正相硅胶柱层析、凝胶柱层析、高效液相制备色谱等分离手段进行分离纯化,得到50个化合物,鉴定了34个,其中6个为新化合物,1个为新天然产物。 从YIM DT10112菌株液体发酵液提取物中分离得到11个化合物,鉴定了6个。6个化合物均是葸醌类化合物,其中CDD-2、CDD-3、CDD-4为新化合物。 从YIM DT10072菌株液体发酵液提取物中分离得到14个化合物,鉴定了8个,主要为芳香内酯、核苷、酚等结构类型,结构类型较为丰富。CDD-12为新化合物,为二氯取代芳香内酯化合物。 从YIMDT10058菌株液体发酵液提取物中分离得到25个化合物,鉴定了20个,主要为二酮哌嗪类化合物,还包含核苷及衍生物、酮、环缩二氨酸等结构类型。其中CDD-21为一个新化合物,与已知二酮哌嗪化合物CDD-20(DiphenylalazineA)互为顺反异构体。CDD-25为一个新化合物,是含硫二酮哌嗪类化合物。CDD-32是首次从天然产物中发现,是尿嘧啶衍生物。