抗猪源链球菌30味中草药的筛选及其活性成分研究

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猪源链球菌是兽医临床中较常见的病原菌,其血清型较多,主要以II型为主,传统治疗方式多为抗生素疗法,但近年来出现抗生素滥用等不良现象,严重导致猪源链球菌耐药菌株的增多,耐药性增强而多变,给我国养猪业带来巨大的经济损失,也给动物食品业带来极大的安全隐患。因此,研发一种天然、绿色,低副作用的抗菌药物增效剂是形势所趋。其中,中草药和抗菌药物联合防治畜禽疾病已成为为重要组成部分,其发挥的作用已引起广泛关注。本实验拟根据猪源链球菌的耐药机制,筛选出能够与环丙沙星联用有协同抑菌作用的中草药,并对其抑菌活性成分及有效部位进行初步研究。1.与环丙沙星合用对猪源链球菌呈协同作用中草药的筛选采用试管二倍稀释法测定30味中草药醇提物、水提物对猪源链球菌(pf-cc)的最低抑菌浓度(MIC),采用棋盘稀释法测定30味中草药醇提物、水提物与环丙沙星联用对猪源链球菌的部分抑菌浓度(FIC),结果显示,所选30味中草药的水提物、醇提物对猪源链球菌均具有一定的抑菌作用,佩兰、黄连、枳壳、郁金等中草药醇提物、水提物对猪源链球菌(pf-cc)抑菌活性较强,苍术水提物等对猪源链球菌的抑菌作用较弱;佩兰醇提物与环丙沙星联用对猪源链球菌的协同抑菌作用相对较强。2.佩兰提取物抑制猪源链球菌的活性成分追踪采用有机溶剂萃取法初步检测与环丙沙星联用具有协同抑菌作用的中草药萃取物的体外抑菌效果,采用硅胶柱层析色谱法对有增强抑菌作用中草药萃取物进行分离纯化及初步活性追踪,并检测纯化得到的物质对pf-cc的抑菌效果,结果显示:佩兰醇提物的乙酸乙酯萃取物、氯仿萃取物与环丙沙星联用对猪源链球菌分别具有协同、相加抑菌作用,从氯仿萃取物中分离纯化出物质E,经鉴定,此化合物为脂肪酸甘油三酯,对猪源链球菌无抑菌作用。3.佩兰中黄酮类化合物等有效成分研究采用聚酰胺柱色谱分离法及大孔树脂柱色谱分离法分离提取佩兰中黄酮类、皂苷类化合物,并采用试管二倍稀释法及棋盘稀释法检测其对猪源链球菌的抑菌情况,结果显示,佩兰中存在黄酮类化合物及皂苷类化合物,有抑菌作用,且部分与环丙沙星联用具有协同、相加抑菌作用。
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