铁皮石斛(Dendrobii officinalis caulis)为兰科石斛属植物铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)的茎,直接鲜用或干燥加工为枫斗、干条、干片等商品规格使用。近年来,铁皮石斛人工栽培产业化在我国已经成熟,栽培模式多样。然而,由于栽培种植成本高,药材市场上出现了很多由石斛属其他种的加工品,极易与铁皮枫斗、干片等混淆,甚至直接冒充铁皮石斛流通。为了准确鉴别铁皮石斛,深入了解铁皮石斛在栽培种植和干燥加工后化学成分的变化规律,本论文采用薄层色谱鉴别方法对铁皮石斛及其常用混淆品进行了定性鉴别研究,建立了铁皮石斛中黄酮类成分一测多评的含量测定方法,采用离线全二维液相色谱/高分辨质谱(2D-LC/MS)方法对铁皮石斛中的化学成分进行定性表征,进而为铁皮石斛质量评价体系的完善提供参考。1.运用课题组前期已建立的铁皮石斛薄层色谱鉴别方法,进一步考察该方法的适用性;同时扩大铁皮石斛及其同属易混淆品的样品量,以铁皮石斛对照药材及黄酮类成分佛莱心苷为对照,分别对铁皮石斛及其同属7种石斛进行薄层色谱比较分析。结果显示,该鉴别方法稳定性好,专属性强,能有效区分铁皮石斛及其同属易混品。2.建立铁皮石斛中6种黄酮类成分一测多评结合双波长法的HPLC含量测定方法。在340 nm波长下以芦丁为内标,计算维采宁-2、夏佛塔苷、异夏佛塔苷和glucosylvitexin的相对校正因子(RCF),并利用RCF对这四个成分进行含量测定,在290 nm波长下运用外标法对柚皮素进行含量测定。结果在一定的线性范围内,维采宁-2、夏佛塔苷、异夏佛塔苷和glucosylvitexin的相对校正因子(RCF)值分别为0.62、0.63、0.60和0.69;一测多评法与常规外标一点法比较无显著性差异(P>0.05),表明所建立的方法可用于铁皮石斛黄酮类成分的定量分析。将该方法运用于不同栽培方式和不同加工的铁皮石斛样品进行测定,结果显示仿野生种植的铁皮石斛6种黄酮类成分总量高于大棚种植;同一种植方式不同产地之间也存在显著差异,云南产含量较低;不同加工方式的铁皮石斛6种黄酮类成分总含量鲜片显著高于枫斗和干条,芦丁与柚皮素含量随着加工温度的升高具有一定的变化,在一定温度范围内,温度升高,芦丁含量总体趋势降低,柚皮素含量升高。对六种黄酮类成分进行PCA分析得到累积贡献率为87.43%的三个主成分,其中第一主成分与维采宁-2、夏佛塔苷、异夏佛塔苷呈高度正相关,第二主成分与柚皮素呈正相关,第三主成分与芦丁呈正相关;为进一步确定6种黄酮类成分的相互关系,对其进行Pearson相关性分析,结果显示柚皮素含量与维采宁-2、夏佛塔苷、异夏佛塔苷和glucosylvitexin含量呈显著正相关,异夏佛塔苷与维采宁-2、夏佛塔苷含量,夏佛塔苷与维采宁-2含量呈显著正相关,而glucosylvitexin与异夏佛塔苷含量呈显著负相关,表明这五种黄酮类成分在积累过程中具有一定相关性。3.建立了铁皮石斛离线全二维液相色谱的分离方法,同时采用高分辨质谱对其化学成分进行定性表征,最终从铁皮石斛中鉴定出了各类成分共计61个。包括8个黄酮氧苷类、13个黄酮碳苷类、5个黄酮苷元、10个联苄类以及25个其他类型化合物,其他类型化合物包括生物碱类、菲类、倍半萜类、香豆素类、蒽醌类、有机酸和糖类等多种类型。