超声破坏微泡促进大鼠骨骼肌血管新生的时效关系研究

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第一部分超声破坏微泡促进正常大鼠骨骼肌血管新生的时效关系研究目的:探讨超声破坏微泡促进正常大鼠骨骼肌血管新生的时间-效应关系。方法:将48只健康SD大鼠随机分为4组:对照组、单纯超声组、单纯微泡组和超声破坏微泡组。超声破坏微泡组经尾静脉输入自制的脂质全氟丙烷微泡造影剂0.5 ml,随即用频率为1.0 MHz,声强为2.0 W/cm2的超声在其大腿骨骼肌局部作用3 min;单纯超声组仅在骨骼肌局部用同等的超声能量作用;单纯微泡组仅由尾静脉输入脂质全氟丙烷微泡造影剂0.5 ml;对照组不作任何处理。处理结束后的第3、7、10、14、21、28 d,各组分别取两只大鼠处死,取局部骨骼肌做石蜡切片HE染色观察显微结构的变化,CD34免疫组化计数微血管密度(MVD),酶联免疫吸附试验(ELISA)定量评价血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:超声破坏微泡组有较多的血管新生;单纯超声组新生血管较少;单纯微泡组和对照组未见血管新生。随着时间的变化,超声破坏微泡组的MVD值和VEGF表达在第10 d达到高峰;单纯超声组的高峰出现在第14 d。结论:超声破坏微泡可刺激骨骼肌中内源性VEGF较快、较多地分泌,从而更好地促进新生血管生成。第二部分超声破坏微泡促进下肢缺血大鼠骨骼肌血管新生的时效关系研究目的:探讨超声破坏微泡促进下肢缺血大鼠骨骼肌血管新生的时间-效应关系。方法:将76只切断双侧股动脉一周后的SD大鼠随机分为4组:对照组、单纯超声组、单纯微泡组和超声破坏微泡组。超声破坏微泡组经尾静脉输入脂质全氟丙烷微泡造影剂0.5 ml,随即用1.0 MHz,2.0 W/cm2的超声在其双侧大腿骨骼肌局部作用3 min;单纯超声组仅在骨骼肌局部用同等的超声能量作用;单纯微泡组仅由尾静脉输入脂质全氟丙烷微泡造影剂0.5 ml;对照组不作任何处理。处理结束后的第3、7、10、14、21、28 d,用免疫组化、酶联免疫吸附试验(ELISA)、彩色多普勒血流显像(CDFI)和国产DFY-Ⅱ型超声图像定量分析诊断仪等方法检测和观察微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达和血管新生的情况。结果:超声破坏微泡组有较多的血管新生,单纯超声组新生血管较少,单纯微泡组和对照组也有少量血管新生。随着时间的变化,超声破坏微泡组的MVD值和VEGF表达在第7 d达到高峰,单纯超声组的高峰出现在第14 d;CDFI检查和DFY-Ⅱ型诊断仪分析表明,超声破坏微泡组可探及较多的血流信号(P<0.05)。结论:用超声破坏微泡的方法可明显促进缺血骨骼肌的VEGF表达,且产生效果快、持续时间长,从而可更好的促进新生血管生成。
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