Neurexophilin4（NXPH4）是一种神经突触的分泌蛋白,属于Neurexophilin（NXPH）家族。其家族蛋白最早被认为是一种神经糖蛋白,其成熟肽分子量为29 k D,因其与神经元表面蛋白（neuronal membrane proteins）Neurexin Iα紧密结合而命名,在神经系统中大量表达。目前发现NXPH4在胶质瘤,肝癌,非小细胞肺癌,结直肠癌,乳腺癌,以及其他多种癌细胞中是高表达的,在神经胶质瘤中表型尤为明显,所以我们希望通过对NXPH4在神经胶质瘤中的作用机制的研究来初步探索一下神经胶质瘤的发生发展机制。神经胶质瘤是中枢神经系统中最常见的脑部肿瘤,而胶质母细胞瘤（glioblastoma multiforme,GBM）是其中恶性程度最高的一种,具有极高侵袭性、发生率死亡率高,预后较差的特点,其患者的生存期一般在12-15个月。随着科学手段的进步,目前主要治疗手段包括手术切除、放化疗、以及当前研究比较热的免疫治疗。胶质瘤的发生和发展是一个非常复杂的生物学过程,包括分子水平、细胞水平的变化。当前临床上的一些药物,如替莫挫胺、贝伐单抗等,因为个体的差异性,在患者中的治疗效果依然很差。因此,只有全面深刻的了解胶质瘤的发病机制,才能有针对性的创造更好的治疗方式。在本实验中通过进化生物学和信息学手段进行数据分析发现NXPH4不仅在神经胶质瘤细胞中是高表达的,实体瘤的低氧环境促进了NXPH4在胶质瘤细胞中的表达水平,而且在各级别神经胶质瘤的临床组织样本中也是高表达的,并且NXPH4的表达量与病人生存率及预后呈负相关;因此我们拟探究NXPH4在胶质瘤细胞中的生物学功能。首先根据胶质瘤细胞系的表达量情况选择了U251/A172细胞系构建了NXPH4稳转敲低细胞系,通过Growth Curve、Brd U染色等实验,证实胶质瘤细胞敲低NXPH4蛋白表达后,细胞的增殖明显受到抑制,而Transwell、细胞划痕等实验,表明了胶质瘤细胞敲低NXPH4蛋白表达后,细胞的增殖明显受到抑制;利用生物信息学分析手段,我们分析得出NXPH4敲低后可能通过阻止细胞周期以及降低细胞自我更新能力导致胶质瘤细胞的增殖和迁移能力受到抑制,所以通过利用流式细胞术和细胞成球实验的结果证明了敲低NXPH4后细胞周期阻滞在G0/G1期,并且其细胞自我更新能力受到了抑制。目前实验下游具体分子机制任处于探究阶段。综上所述,本实验已成功建立了稳定敲低NXPH4蛋白的胶质瘤细胞系（U251/A172）,发现受低氧诱导表达的NXPH4通过影响细胞增殖和迁移从而影响胶质瘤发生发展。