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乳腺癌(carcinoma of the breast)是女性常见的恶性肿瘤之一,发病率位居女性恶性肿瘤的首位或第二位。目前对乳腺癌的治疗采取包括外科手术治疗、化学治疗、放射性治疗、内分泌治疗及生物免疫治疗等综合性治疗。检测乳腺癌组织雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptor,PgR)的表达情况对于判断乳腺癌患者的预后以及是否需要进行内分泌治疗具有指导意义。据文献报道,临床上ER和PgR呈阴性表达的非激素依赖性乳腺癌约占全部乳腺癌的30～40%,此类乳腺癌患者的预后较差,复发率较高,因此,深入研究ER阴性乳腺癌的发生机制显得尤为重要。最近的研究发现BP1(beta protein 1)和环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)与乳腺癌的发生、发展关系密切,并且与肿瘤组织ER的表达状态呈负相关。本研究运用RT-PCR技术检测了ER阴性的人乳腺癌细胞MDA-MB-435和ER阳性的人乳腺癌细胞MCF-7中BP1、COX-2 mRNA的表达,并运用免疫组织化学方法检测了BP1、COX-2蛋白在上述两种细胞株中的表达情况,分析两者与乳腺癌雌激素受体的关系,并探讨两者的相关性,旨在为乳腺癌的治疗尤其是对ER阴性的乳腺癌的治疗提供新的靶点和理论依据。实验方法1、体外培养人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7。2、采用Trizol试剂提取培养细胞的总RNA,检测RNA的纯度。3、使用AMV逆转录试剂盒逆转录,运用PCR技术扩增检测目的基因的表达。4、运用免疫组织化学方法检测体外培养细胞中BP1、COX-2的表达。5、运用SPSS12.0统计软件,采用t-检验、Pearson相关系数等方法对实验数据进行统计学处理,检验水准按α=0.05。实验结果1、BP1 mRNA在人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7中的表达有差异(t=4.667,P＜0.01),COX-2 mRNA在人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7中的表达有差异(t=3.225,P＜0.01)。2、免疫组织化学染色结果显示:BP1在人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7中的表达有差异(t=5.356,P＜0.01),COX-2在人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7中的表达有差异(t=4.290,P＜0.01)。3、Pearson系数相关性分析结果显示:乳腺癌BP1与COX-2的表达存在显著关联性(r=0.603,P＜0.01),BP1与ER存在负相关(r=-0.708,P＜0.01),COX-2与ER存在负相关(r=-0.627,P＜0.01)。结论1、BP1、COX-2在人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7中的表达有差异,在ER阴性的人乳腺癌细胞株MDA-MB-435中的表达较高,BP1、COX-2与ER之间呈负相关的表达关系。2、在ER阴性的乳腺癌中,BP1和COX-2的表达存在正相关,为人工干预BP1、COX-2的表达改善ER阴性乳腺癌患者的预后提供治疗靶点和理论依据。