酵母菌作为一种基因工程的受体菌,在制药行业和生物技术行业中都有着举足轻重的贡献。而许多有关酵母的研究,例如通过基因转化和细胞融合进行基因重组以及核酸的提取,都需要去除酵母菌的细胞壁,得到原生质体。目前裂解细胞壁通常使用酶解法和机械破壁法,酶解法较为温和且通常具有选择性,但是其价格昂贵、步骤繁杂,这也限制了酵母菌的大量生产及应用;机械破壁法通常反应剧烈,可能会使细胞膜破裂。本实验室发现了四氧化三铁磁性纳米粒子（Fe3O4MNPs）对酿酒酵母的裂解活性,并利用显微镜以及原子力显微镜研究了其裂解产物,证明得到了原生质体,但是制备的这种原生质体是否能够再生或者进行遗传转化尚不清楚。本论文首先重复了Fe3O4 MNPs对S.cerevisiae CEN.PK113-11C的裂解活性,接着利用Fe3O4 MNPs处理S.cerevisiae CEN.PK113-11C、S.cerevisiae CEN.PK2-1C、S.cerevisiae EBY-100、P.pastoris X33等不同类型菌株的细胞壁提取基因组,并且与玻璃珠提取DNA进行对比。结果发现无论是用Fe3O4 MNPs还是玻璃珠都能提取出基因组,而阴性对照中没有基因组DNA的痕迹。该结果表明Fe3O4 MNPs为基因组的提取提供了一种新方法。从基因组的提取中不能证明得到的原生质体是否能存活,而酵母菌转化的前提是需要活的原生质体,所以在第三章中先研究上述四种菌株的原生质体的再生,接着用S.cerevisiae CEN.PK2-1C、P.pastoris X33进行转化。对于S.cerevisiae CEN.PK2-1C的转化过程,利用的质粒是p RS416,用不含尿嘧啶的双层琼脂平板筛选阳性转化子。对于P.pastoris X33的转化,本论文选择的质粒是p PICZαA,用含有Zeocin抗性的YPDS平板筛选阳性转化子,结果发现平板上无单菌落出现,但是电转化过程可以得到单菌落,由于抗生素对没有细胞壁的细胞的生长有抑制作用,所以这个结果也验证了Fe3O4 NMPs裂解的对象是酵母菌的细胞壁。本论文的研究结果表明Fe3O4NMPs裂解制备的原生质体能成功地用于DNA的提取和转化。氧化铁磁性纳米粒子裂解酵母菌细胞壁有望成为一种制备原生质体的替代方法,并为基于酵母的生物技术应用打开大门。