Lnc247对C2C12成肌细胞分化调控作用的研究

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长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)是一类不具有功能性开放阅读框(open reading frame,ORF)且转录本长度超过了200个核苷酸的RNA分子。近年来多项研究表明,LncRNA可以在表观遗传学水平、转录水平以及转录后水平通过多种机制对基因表达进行调控,并发现其在骨骼肌发育调控中起到了重要作用。本实验室通过RNA测序技术发现了新的长链非编码RNA Lnc247-Foxk1基因的天然反义LncRNA。Foxk1是骨骼肌发育过程中重要的调控因子,调节着成肌细胞的增殖与分化。因此,研究Lnc247对C2C12成肌细胞分化的调控作用具有重要的意义。  为了探明Lnc247在C2C12成肌细胞分化中的调控作用,采用实时定量PCR检测了Lnc247和Foxk1在小鼠各组织及C2C12成肌细胞分化过程中的表达。结果表明,Lnc247和Foxk1在小鼠各组织中均有表达,两者在脾脏和脂肪中表达量最高,心脏和肌肉中表达量最低,Lnc247和Foxk1随着细胞分化过程表达量逐渐降低。在C2C12成肌细胞中上调或下调Lnc247的表达后,采用实时定量PCR和western blot分别检测成肌标志基因MHC与成肌因子MyoG mRNA和蛋白水平的变化,用细胞免疫染色观察肌管的形成。结果显示,上调Lnc247的表达后,细胞分化作用显著增强。以上结果说明,Lnc247能够促进C2C12成肌细胞的分化。本文研究结果对初步阐明LncRNA调控骨骼肌分化作用提供了理论基础。
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