两株异养硝化—好氧反硝化细菌的分离、筛选、鉴定和特性研究

来源 :华南理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:terzaghi
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异养硝化-好氧反硝化细菌是一类同时具有异养硝化和好氧反硝化能力的细菌。研究这类细菌的硝化反硝化效率的影响因素有助于提高好氧条件下的同时硝化反硝化的脱氮效率。但是已经被分离出来的异养硝化-好氧反硝化细菌种类较少,脱氮效率也不高。为了获得到高效异养硝化-好氧反硝化细菌,并研究这些细菌的特性,本课题从大坦沙污水处理厂生化池污泥中,通过富集和分离得到32株具有硝化反硝化性能的单菌株,并从中筛选得到了两株具有较高异养硝化-好氧反硝化性能的菌株A1-1和O-1。对两株细菌进行分子生物学鉴定,然后研究碳源、碳氮比和温度这三个反应条件对两株细菌的异养硝化-好氧反硝化能力影响。其中采用的碳源为蔗糖、果糖、柠檬酸、淀粉、甲醇和葡萄糖;温度设定为15℃、20℃、25℃、30℃、37℃和40℃;碳氮比设定为2、5、8、10和12。16S rDNA比对结果显示菌株A1-1的16S rDNA与Pseudomonas stutzeri有100%的相似性;菌株O-1的的16S rDNA与Alcaligenes denitrificans有97%的相似性。在保持其它条件不变的情况下,菌株A1-1在碳源为柠檬酸的时候异养硝化-好氧反硝化效率最大,硝化效率约为40%,脱氮效率为80%,碳源为甲醇的时候异养硝化-好氧反硝化效率最小。菌株O-1在为柠檬酸的时候异养硝化-好氧反硝化效率最大,硝化效率约为27%,脱氮效率为40%。菌株A1-1的异养硝化-好氧反硝化效率高于已发现的异养硝化-好氧反硝化细菌。菌株A1-1的生长和进行异养硝化-好氧反硝化最适温度为30-37℃,菌株O-1的最适温度为25-30℃。提高碳氮比对于两种细菌的生长和异养硝化-好氧反硝化都有促进作用。但是当碳氮比超过8时,提高碳氮比对A1-1影响变小。通过细菌体氮的检测方法进行了改进,采用离心分离菌液得到细菌,用碱性过硫酸钾法直接测量细菌的含氮量的方法测量。改进了以往的研究者采用的是用细菌干重和细菌细胞的经验分子式来估算的细菌体氮方法。最终分别建立了A1-1和O-1的细菌悬浮液光密度与细菌体氮的关系式。
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