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目的:研究异丙肾上腺素(Isoproterenol,Iso)诱导大鼠心肌肥厚(cardiac hypertrophy,CH)中RhoA/ROCK信号通路的作用及法舒地尔(Fasudil,Fas)的干预效应。方法:采用皮下注射Iso制备大鼠CH模型。Sprague-Dawley大鼠48只,体重180g~200g,随机分为4组:正常对照组、Iso模型组、Fas低剂量组(L-Fas,5mg/kg/d)、Fas高剂量组(H-Fas,20mg/kg/d),每组12只。除正常对照组外,其余3组大鼠均皮下注射Iso制备CH模型,Fas治疗组采用预防给药方式,L-Fas组同时给予Iso(皮下注射,5mg/kg/d)+Fas(腹腔注射5mg/kg/d),H-Fas组同时给予Iso(皮下注射,5mg/kg/d)+Fas(腹腔注射,20mg/kg/d),正常对照组及Iso模型组给予等量生理盐水,给药8周。疗程结束后,进行下列指标检测:(1)每组随机取6只大鼠进行超声心动图检测大鼠射血分数(EF)、缩短分数(FS)、左心室后壁厚度(LVPW)及室间隔厚度(IVS);(2)每组随机选取6只大鼠,称量体重后,进行血流动力学检测,观察左心室收缩压(LVSP)、左心室末期舒张压(LVEDP)、左心室收缩最大速率(+dp/dtmax)和左心室舒张最大速率(-dp/dtmax)及心率(HR)变化;(3)血流动力学结束,经颈总动脉取血,检测血清一氧化氮合酶(NOS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性、一氧化氮(NO)的水平,待取出心脏后检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;(4)取血完毕,迅速取出心脏,清除血渍,称取心脏重量(HW)和左心室重量(LVW),计算心脏重量指数(HWI)和左心室重量指数(LVWI);(5)每组选取6例心脏,用石蜡包埋,制作组织病理切片,分别进行HE染色观察心肌组织病理学改变和Masson染色观察心肌纤维化程度,同时采用免疫组织化学方法观察各组大鼠心肌组织RhoA、ROCK1、ERK1/2和c-FLIP蛋白的表达。(6)剩余每组6例心脏,采用半定量RT-PCR法检测各组大鼠心肌组织中RhoA、ROCK1、ERK1/2和c-FLIP mRNA的表达变化。结果:(1)超声心动图检测。与正常对照组比较,Iso模型组大鼠LVPW(P<0.05)和IVS(P<0.01)显著增加,而EF和FS显著下降(P<0.01)。与Iso模型组比较,L-Fas组IVS显著下降(P<0.05),而EF显著升高(P<0.05),LVPW和FS无明显差异;H-Fas组LVPW(P<0.05)、IVS(P<0.01)显著降低,EF(P<0.01)、FS(P<0.05)显著升高。(2)血流动力学变化。与正常对照组比较,Iso模型组的HR(P<0.05)和LVEDP(P<0.01)明显增加,而LVSP和±dp/dtmax显著下降(P<0.01)。与Iso模型组对比,L-Fas组LVSP显著升高(P<0.05);H-Fas组HR和LVEDP明显下降(P<0.05),而LVSP和±dp/dtmax明显升高(P<0.05)。(3)血液及心肌组织生化指标测定。与正常对照组比较,Iso模型组NO含量及NOS、SOD和GSH-PX活性显著降低(P<0.01),而MDA含量显著升高(P<0.01)。与Iso模型组比较,L-Fas组NO(P<0.05)含量和NOS(P<0.05)、SOD(P<0.01)、GSH-PX(P<0.01)活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.01);H-Fas组NO(P<0.05)含量和NOS(P<0.05)、SOD(P<0.01)、GSH-PX(P<0.01)活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.01)。(4)心重指数的测定。与正常对照组比较,Iso模型组的HW、LVW、HWI、LVWI显著升高(P<0.01);与Iso模型组比较,L-Fas组HW、LVW、HWI、LVWI显著降低(P<0.05);H-Fas组HW、LVW、HWI、LVWI显著降低(P<0.01)。(5)心肌组织病理学及免疫组化检测。HE、Masson染色后,与正常对照组比较,Iso模型组心肌细胞体积变大,细胞间隙增大,细胞排列紊乱,心肌间质纤维化程度严重;Fas给药后,细胞体积减小,细胞间隙变小,细胞排列整齐,纤维化程度明显减小。免疫组化发现Iso模型组大鼠RhoA、ROCK1和ERK1/2蛋白表达量显著增加(P<0.01),c-FLIP蛋白表达量显著下降(P<0.01)。与Iso模型组比较,L-Fas组RhoA、ROCK1和ERK1/2蛋白表达量显著下降(P<0.01),c-FLIP蛋白表达量显著增加(P<0.01),H-Fas组RhoA、ROCK1和ERK1/2蛋白表达量显著下降(P<0.01),c-FLIP蛋白表达量显著增加(P<0.01)。(6)心肌组织RhoA、ROCK1、c-FLIP和ERK1/2 mRNA的表达。与正常对照组比较,Iso模型组的RhoA、ROCK1和ERK1/2 mRNA表达明显上调(P<0.01),c-FLIP mRNA表达明显下调(P<0.01)。与Iso模型组比较,L-Fas组RhoA(P<0.05)、ROCK1和ERK1/2mRNA表达明显下调(P<0.01),c-FLIP mRNA表达显著上调(P<0.01),L-Fas组RhoA、ROCK1mRNA表达量显著减小(P<0.01),c-FLIP mRNA表达量显著增加(P<0.01)。结论:RhoA/ROCK、ERK1/2信号通路,参与了Iso诱导的大鼠CH,Fas对CH具有保护作用,其作用机制可能与Fas阻断RhoA/ROCK、ERK1/2信号通路,调节RhoA、ROCK1、c-FLIP、ERK1/2蛋白表达,清除氧自由基,抑制脂质过氧化,促进NO释放有关。