大豆亲和性根际促生菌的筛选、定殖及其促生效果的研究

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为筛选具有大豆亲和性的高效根际促生菌,本研究采用选择性培养基结合大豆凝集素的双重筛选技术,从大豆根际筛选出36株与大豆具有特异亲和性的根际促生菌,其中具有溶解无机磷能力的菌株12株,具有降解有机磷能力的菌株9株,具有解钾能力的菌株15株。经形态学实验、生理生化实验和16SrRNA基因序列的分子鉴定,这36株菌分属:芽孢杆菌属(Megaterium sp.)、茎菌属(Caulobacter sp.)、节杆菌属(Arthrobactersp.)、肠杆菌属(Enterobacter sp.)、假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、根瘤菌属(Rhizobiumsp.)和贪铜菌属(Caulobactersp.)。将筛选获得的36株大豆亲和性根际促生菌进行促生长特性检测,发现其中6株菌溶解磷酸三钙的能力达100 mg·L-1以上,4株菌降解植酸钙的能力超过100 mg·L-1,15株菌解钾能力超过10 mg·L-1。36株菌均可产生IAA,其中13株菌产IAA能力超过10 mg·L-1,17株菌可产生铁载体,16株菌同时具有3个促生长特性。从36株促生菌中选取两株肠杆菌DN9菌株和DW12菌株,采用电转化法将发光酶luxAB基因转入这两株菌中,获得luxAB基因标记菌株DN9-L和DW12-L。追踪标记菌株在大豆根际的定殖动态,研究菌株对大豆根系发育及幼苗生长的影响,结果表明与大豆凝集素不亲和的菌株无法在大豆根际定殖生存,而两株大豆亲和性菌株DN9-L、DW12-L能够稳定的在大豆根际定居繁殖,并对大豆的生长和根系发育产生显著促进作用。选取7株促生性能优良的亲和性菌株进行盆栽试验。结果表明,在养分缺失的情况下,DW1、DN9、DN11对大豆叶片鲜重、叶片干重、有效分支数、单株豆重、根鲜重、根干重均具有显著促进效果。其中DW1菌株对大豆植株生长的促进效果最佳,施加DW1在大豆产量、根部鲜重、根部干重、叶片中含氮量、叶片含磷量、土壤含磷量、土壤含钾量方面较对照组分别提高24235%、3.14%、12.17%、74.58%、2.63%、143.41%、49.31%。进一步通过大田试验检验7株大豆亲和性促生菌株对大豆生长及产量的促进作用。实验结果表明,在养分缺乏的土壤中,DW1、DN9、DN11可以促进大豆植株生长,增加大豆单株荚数、单株粒数、百粒重、3粒荚数、4粒荚数、提高大豆产量。其中施加DN9的大豆百粒重、单株粒数和单株荚数分别较未处理的对照组分别增加37.9%、70.9%和 65.9%。
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