【摘 要】
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千层塔,学名蛇足石杉(Huperzia serrata (Thunb.ex Murray) Trev),是石杉属(Huperzia)植物中的传统中草药之一,石杉碱甲(Huperzine A)是其主要生物活性物质。药理学研究表明,
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千层塔,学名蛇足石杉(Huperzia serrata (Thunb.ex Murray) Trev),是石杉属(Huperzia)植物中的传统中草药之一,石杉碱甲(Huperzine A)是其主要生物活性物质。药理学研究表明,石杉碱甲是一种重要的低毒、高效、高选择性和可逆性的乙酰胆碱酶抑制剂,具有治疗老年痴呆、重症肌无力、精神分裂疾病等多种功效。本文以千层塔茎尖为外植体,建立了千层塔组织培养体系,诱导获得了绿色球状体和丛生苗,并研究了激素对丛生苗生长及其对石杉碱甲合成的影响。主要研究结果如下:(1)千层塔组织培养体系的建立。研究发现,12月采集的千层塔茎尖为外植体时组织培养的成功率较高,1/4MS矿质元素+1/2MS有机元素+2%蔗糖的改良MS培养基最适合外植体生长。随着培养的进行,在改良MS培养基上,观察到4种类型的外植体形态发生,即:绿色球状体、二叉分支、多叉分支和无二叉分支。(2)激素对丛生苗生长和石杉碱甲合成的影响。以丛生苗为材料,考察了生长素(吲哚乙酸IAA、吲哚丁酸IBA)和细胞分裂素(6-苄氨基嘌呤BA、激动素KT)对丛生苗生长和石杉碱甲合成的影响。结果表明,IAA和IBA对丛生苗生长和石杉碱甲的积累具有促进作用,较高浓度的BA(>2μM);和KT(>5μM)对丛生苗生长和石杉碱甲的合成具有一定的抑制作用;培养60天后,10μM的IBA对丛生苗的生长作用效果最佳,生长速率达9.4 mm/月,新叶形成数达4片/月,生物量增加5.1倍;2μM的IAA对石杉碱甲合成较有利,培养40天后,含量达到612.3μg/g DW; 10μM的IBA能显著促进丛生苗生根及根的生长;2μM的BA有利于丛生苗的再生。研究成果不仅能为深入研究石杉碱甲的生物合成途径提供原始技术资料,而且将为解决石杉碱甲资源短缺问题提供一条新途径。
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