原代食管癌相关成纤维细胞对食管鳞癌细胞的影响

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目的探讨食管癌相关成纤维细胞(CAF)对食管鳞癌细胞的生长、侵袭的影响,及其对食管鳞癌(ESCC)细胞放化疗抗性的影响。方法手术切除的新鲜食管鳞癌组织经原代培养,分离纯化出食管癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblast,CAF),并经免疫组化初步鉴定。用20%FBS RPMI1640培养液培养CAF48小时后将培养液收集、离心,取上层培养基,制成CAF培养基。将其用以培养食管鳞癌KYSE-150细胞系,共培养14天,2-3天换液,观察其形态变化。用普通10%FBS RPMI1640培养基培养的KYSE-150做对照。用MTS法检测两组KYSE-150的生长增殖变化。划痕实验观测其细胞侵袭性的变化。同时用MTS法检测两组细胞对紫杉醇、顺铂的化疗敏感性差异。采用克隆形成试验检测两组细胞的放疗敏感性差异。结果经CAF的培养液培养的KYSE-150形态改变明显。CAF培养基培养的KYSE-150细胞增殖活性增高明显,24h、48h、72h、96h的生长速度较普通KYSE-150明显增快,差异有统计学意义(P<0.05)。划痕试验显示其侵袭性也明显增高。CAF培养基培养的KYSE-150细胞对各个浓度的顺铂及紫杉醇的抗性较KYSE-150明显增强,克隆形成试验显示其放疗抗性亦明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CAF能增加食管鳞癌细胞KYSE-150的增殖活性及侵袭力,并改变其放化疗抗性。
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