论文部分内容阅读
端粒酶是维持端粒长度的一种逆转录酶，对细胞增殖和癌变起重要作用。端粒酶的催化亚基TERT是它的限速成分，正常人体细胞中端粒酶的活性受到抑制，但是85％以上的肿瘤细胞通过上调TERT来活化端粒酶。因此TERT是正常细胞转变为肿瘤细胞的关键性蛋白，是抗肿瘤治疗的重要靶点，而目前对于TERT这一限速成分的调控机制尚不完全清楚。研究表明端粒酶的活性随着细胞周期的进展而呈现不同的水平，提示细胞周期调控相关蛋白可能参与其活性的调节。我们的研究旨在发现一种新的端粒酶活性的调控机制，阐明细胞周期网络调控系统与端粒酶活性的相关性。 我们通过免疫共沉淀实验筛选到Polo样激酶1(Plk1)是一个新的hTERT相互作用蛋白，它可以与有活性的端粒酶复合物结合;同时我们证实了Plk1通过氨基端与hTERT结合并且Plk1的激酶活性不影响Plk1与hTERT的相互作用。进一步的实验表明Plk1敲低导致端粒酶活性下降，相反，Plk1过表达可以上调端粒酶的活性。通过分析我们发现过表达Plk1可以上调hTERT的蛋白表达水平并且延长hTERT蛋白的半衰期从而提高它的稳定性，这是通过增强hTERT与染色体的结合和抑制hTERT的泛素化降解两个途径来实现的。上述结果证实了Plk1是通过增加hTERT蛋白的稳定性来正向调节端粒酶活性的，该研究有助于我们了解Plk1在肿瘤发生发展过程中所起的作用，为寻找新的抗肿瘤靶标提供理论依据。