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第一部分血清25(OH)与高血压的相关性研究 [研究目的] 本研究通过检测并比较正常人、高血压患者血清25-羟基维生素D的水平,从而探讨维生素D与高血压相关性及影响因素。 [研究方法] 1、研究对象:2016年3月~2017年1月至江苏省人民医院体检中心进行健康体检的人群,受检者年龄在45~65岁范围内,经过入选及排除标准后,纳入高血压患者86人,即为高血压组,同时纳入年龄、性别匹配的健康体检者88人作为对照组。 2、临床资料采集:空腹抽血检测空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、尿酸(UA)、肌酐(Cr)等生化指标。用酶联免疫法吸附测定血清25-羟基维生素D水平[25(OH)D]。由本院的体检中心医师测量身高、体重、腰围等人体测量学指标和收缩压(SBP)、舒张压(DBP),并计算体质指数(BMI)和脉压差(PP)。详细问诊体检者的既往疾病及服药史等信息。 3、统计软件分析:采用SPSS19.0统计软件分析数据。连续变量以均数±标准误((x)±s)表示,分类变量以例数或百分比表示,对非正态分布的变量进行对数转化。两组间的参数比较采用两组独立样本T检验;计数资料的比较采用卡方(x2)检验;参数之间进行Pearson相关分析和多元线性逐步回归分析来确定参数间的变化依存关系。P<0.05,表示差异具有统计学意义。 [研究结果] 1.高血压组的SBP、DBP、PP、TG、LDL-C、UA、FPG的水平高于对照组,但HDL-C、Cr的水平低于对照组,具有统计学差异(P<0.05);高血压组的血清25(OH)D水平(24.13±5.44ng/ml)低于对照组(27.91±6.03ng/ml)人群的水平,具有显著性差异(P<0.001)。 2.高血压组男性血清25(OH)D水平24.26±5.83ng/ml,血清女性25(OH)D水平23.91±4.82ng/ml,男性和女性的血清25(OH)D水平比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。 3.将两组的血清25(OH)D水平分为3组,依次分别为:血清25(OH)D≥30ng/ml为充足,20≤25(OH)D<30ng/ml为不足,25(OH)D<20ng/ml为缺乏,高血压组在各组的所占比例分别为:22.1%,57.0%,20.9%;对照组在各组的所占比例分别为37.5%,52.3%,10.2%。高血压组的维生素D缺乏(20.9%)的状况高于对照组(10.2%),差异具有统计学意义(P<0.05)。 4.血清25(OH)D水平与SBP、DBP、BMI和生化指标行Pearson相关分析后,血清25(OH)D水平与 SBP(r=-0.494,P<0.001)、 DBP(r=--0.480,P<0.001)、TG(r=-0.333,P<0.001)、LDL-C(r=-0.358,P<0.001)、FPG(r=-0.371,P<0.001)呈负性相关,与HDL-C(r=-0.153,P<0.05)呈正性相关。 5.血清25(OH)D与SBP、DBP、和生化各指标的多元线性逐步回归结果,SBP(β=-0.062,P=0.020)、DBP(β=-0.116,P=0.008)、LDL-C(β=-2.352,P<0.001)、FPG(β=-2.483,P<0.001)、TG(β=-0.062,P=0.026)与25(OH)D呈现出较强的相关性。 [结论] 1.高血压组的血清维生素D低于正常人群,且高血压组患者的维生素D缺乏状况更普遍。 2.分析血压水平和生化指标与血清25(OH)D水平相关性中,发现SBP、DBP、TG、LDL-C、FPG与血清25(OH)D水平呈负性相关,HDL-C与血清25(OH)D水平呈正性相关,提示25(OH)D的低水平可能是高血压发生的危险因素。 第二部分血清25(OH)D与高血压血管内皮损伤的相关性研究 [研究目的] 探讨血清25(OH)D与高血压血管内皮损伤指标EMP和NO是否存在相互关系。 [研究方法] 1.研究对象:同第一部分。 2.研究方法 2.1血压、身高、体重的测量 由一般检查室内的体检中心医师对体检者进行血压、身高体重的测量,按照公式BMI=体重kg/(身高m)2,计算BMI和脉压差(PP)。 2.2实验材料与实验方法 2.21标本的采集 清晨,空腹,用抗凝管抽取研究对象外周静脉血5ml,标本采取后室温静置,2小时内离心处理。内皮微粒的提取,目前国内常用方法的是梯度离心法[1]。采集的血标本于常温下先160g离心10分钟,吸取上层血清置于EP管内,继续1000g常温离心10分钟后吸取上清液,即得血小板贫瘠血浆(PPP)。将PPP于-80℃冰箱保存以备用。 2.22化指标的测定 采用全自动生化仪测定血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、尿酸、肌酐等生化指标。 2.23酶联免疫吸附测定血清中25(OH)D和NO的含量 2.24流式细胞技术测定血浆内皮微粒的水平 3.统计软件分析:采用SPSS19.0统计软件分析数据。连续变量以均数±标准误((x)±s)表示,分类变量以例数或百分比表示,对非正态分布的变量进行对数转化。两组间的参数比较采用两组独立样本T检验;计数资料的比较采用卡方(x2)检验;参数之间进行Pearson相关分析和多元线性逐步回归分析来确定参数间的变化依存关系。P<0.05,表示差异具有统计学意义。 [研究结果] 1.高血压组血浆EMP水平5.60±1.41%,对照组血浆EMP水平2.56±1.42%,高血压组的血浆EMP水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);高血压组血清NO水平45.00±12.28umol/L,对照组血清NO水平53.07±7.38umol/L,两组间有显著差异(P<0.001)。 2.将两组的血清25(OH)D水平分为3组,依次分别为:血清25(OH)D≥30ng/ml为充足,20≤25(OH)D<30ng/ml为不足,25(OH)D<20ng/ml为缺乏,血浆EMP水平在各组分别为2.85±1.34%,4.15±1.98%,6.13±1.82%,组间差异具有统计学意义(P<0.001);血清NO水平分别为52.26±8.75umol/L,49.80±9.11umol/L,43.41±9.39umol/L,组间有显著差异(P<0.001)。 3.血清25(OH)D水平与血管内皮损伤指标(EMP、NO)行Pearson相关分析后,发现25(OH)D水平与EMP(r=-0.494,P<0.001)呈负性相关,与NO(r=-0.153,P<0.05)呈正性相关。 4.EMP与血压和生化各指标的多元线性逐步回归结果显示,SBP(β=-0.042,P<0.001)、25(OH)D(β=-0.111,P<0.001)、FPG(β=0.228,P<0.001)、LDL-C(β=0.310,P=0.015)与EMP呈现出较强的相关性。 [结论] 1.高血压组患者的血浆EMP水平明显高于对照组,而血清NO水平显著低于对照组,说明高血压患者更易发生血管内皮损害。 2.血清25(OH)D水平与血管内皮损伤指标(EMP、NO)行Pearson相关分析后,发现25(OH)D水平与EMP呈负性相关,与NO呈正性相关,提示25(OH)D的低水平状态可能是高血压并发血管内皮损害的危险因素。