利用NaCl离体筛选甘蓝耐盐突变体的技术研究

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开展甘蓝耐盐性研究,探讨甘蓝耐盐育种资源的耐盐性鉴定,研发甘蓝耐盐新品种,解决土壤盐渍化问题,是未来农业发展具有挑战性的的重大课题,对发展我国甘蓝生产具有重要的理论和实践意义。本试验选用秦甘80、越夏王和F52不同耐盐性的甘蓝杂交种为试材,设置盐(NaCl)浓度梯度研究种子萌发期和苗期的品种耐盐性,确立一种甘蓝耐盐性鉴定方法;选用DH12-7、DH136和DH149为试材,设置不同盐浓度和处理时间,利用甘蓝小孢子培养和叶片再生途径盐胁迫离体筛选小孢子细胞和愈伤组织,确立一种耐盐变异体筛选方法,筛选耐盐变异体植株;选用甘蓝小孢子单倍体植株H10-23、H10-3、H10-5为试材,设置秋碱处理浓度梯度和时间梯度,探讨秋碱处理叶片或愈伤组织加倍途径。本研究主要结论如下:1. NaCl盐分胁迫可抑制甘蓝种子的萌发和影响甘蓝幼苗的生长发育,造成盐害的发生;种子萌发期耐盐性鉴定和苗期耐盐性鉴定结果一致;浇盐法与甘蓝苗期和种子萌发期耐盐性鉴定最适浓度0.9%NaCl的配合使用是耐盐性鉴定的最适方法。2.盐浓度200mg/L是甘蓝小孢子培养过程中的最适筛选浓度,其活苗数为9株,再生植株成活率高达14.75%。3.作为离体筛选耐盐突变体的选择压,其筛选浓度大小和筛选时间长短影响耐盐突变体的离体筛选结果。离体筛选耐盐变异体的方法是紫外线诱变3min后盐浓度300mmol/L离体筛选愈伤组织3周,随后反复多次筛选,最终经耐盐性鉴定获得耐盐变异体再生植株。本研究初步得到DH12-7、DH131和DH149试材的耐盐变异体再生植株分别有7株、17株和13株。4.2.0mg/L秋碱处理甘蓝小孢子单倍体植株叶片诱导的愈伤组织30h,可获得再生DH株加倍率58.13%,是最适加倍方法。
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