【摘 要】
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目的:探讨干扰素(IFN)在胃癌MKN45细胞中对胸苷磷酸化酶(TP)表达的调节作用及其对5-氟尿嘧啶抗癌作用的影响。方法:分别用RT-PCR和Western blot检测不同浓度的干扰素-γ(IFN-
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目的:探讨干扰素(IFN)在胃癌MKN45细胞中对胸苷磷酸化酶(TP)表达的调节作用及其对5-氟尿嘧啶抗癌作用的影响。方法:分别用RT-PCR和Western blot检测不同浓度的干扰素-γ(IFN-γ)和不同作用时间诱导后TP mRNA和蛋白质的表达,MTT法确定5-氟尿嘧啶对胃癌MKN45细胞的细胞毒性作用,流式细胞技术分析5-氟尿嘧啶和IFN-γ处理后的肿瘤细胞凋亡。结果:以0、3000、6000和12000IU/ml IFN-γ处理的细胞TPmRNA表达量分别为0.4993±0.0206、0.5716±0.0248、0.8062±0.0280和0.8182±0.0272。Werstern blot结果显示,0、3000、6000和12000IU/ml IFN处理组中TP蛋白表达依次增强,分别为0.5780±0.0133、0.6437±0.0557、0.8027±0.0235和0.8144±0.0314。TP mRNA和TP蛋白的表达随IFN剂量的增加而增强,但至6000IU/ml后再无明显增强。IFN作用不同时间后,提示TP mRNA表达逐渐增强,呈时间依赖性,48hrs组较0h,8h,16h,24h各组均强且差异有统计学意义(P＜0.05),但与72h组差异无统计学意义(P=0.300)。IFN-γ增强胃癌MKN45细胞表达TP,并呈时间和剂量依赖性,在6000IU和48小时诱导表达效果最好。IFN-γ与5-氟尿嘧啶联合应用可使5-氟尿嘧啶对胃癌MKN45细胞半数致死量(IC50)从(13.3448±0.4558)降至(4.0369±0.1674)mmol/L(P＜0.05),同时使MKN45细胞凋亡率增加(P＜0.05)。结论:IFN可诱导胃癌细胞表达TP mRNA和TP蛋白;干扰素γ可降低5-氟尿嘧啶对胃癌细胞IC50,使MKN45细胞凋亡率增加。
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