体外扩增过程中造血细胞生理状态和遗传稳定性研究

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Cskn__ZHANG
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体外扩增技术是解决新鲜脐血中造血干/祖细胞数量稀少问题的有效策略,而扩增后细胞的质量和安全性是影响其临床应用的重要因素。本文以脐血CD34+细胞为对象,分别采用有或无血清培养体系,对体外培养细胞的生理状态、遗传稳定性、染色体核型和克隆形成能力进行了系统的分析,获得下列结果:(1)无论细胞培养基有无血清,细胞的比生长速率、S/G2/M期细胞比例、以及细胞内端粒酶活性均有相似的变化趋势,存在一定的相关性;(2)与CD34-细胞相比,在培养过程中CD34+细胞的凋亡率始终维持在较低水平上,低于新鲜分离的CD34+细胞中的凋亡率,表明CD34+细胞具有很强的抗凋亡特性;(3)在细胞培养过程中,与遗传稳定性相关基因Bmil、hTERT和Survivin mRNA的表达水平随培养时间延长均有不同程度的上调,但与K562细胞中的稳定高表达不同,提示细胞培养没有产生细胞恶化的信号;(4)6个脐血样本用含血清培养体系扩增,染色体核型异常比例较高,达2/3。但是这些异常的发生不具有定向性和稳定遗传性,且未表现出异常增殖的特征,提示有血清培养体系扩增的脐血造血干/祖细胞可能有临床安全性风险,但没有足够证据显示培养细胞出现了恶性转化。这些研究对确保培养细胞移植的安全性与有效性具有重要意义。
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