R5型HIV-1gp120对大鼠心肌损伤及甘草甜素保护效应机制

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第一部分大鼠心肌R5型HIV-1 gp120损伤实验模型制备及评价目的:制备R5型HIV-1gp120损伤大鼠实验模型,评价其心肌损伤情况。方法:4周龄雄性SD大鼠20只,随机分两组(n=10):正常对照组(CON),HIV-1gp120模型组(gp120)。gp120组尾静脉注射R5型HIV-1gp120(50μg/Kg),每天生理盐水(NS)灌胃1次(0.1ml/g)。CON组尾静脉注射NS(50ul/kg),余同gp120组。饲养28天(4周),记录体重,实验前禁食12小时,氨基甲酸乙酯麻醉,测动脉血压,左心室插管测左心室压力分析血流动力学指标(HR、LVSP、LVDP、LVP±dp/dtmax)及对异丙肾上腺素量效反应,腹主动脉取血测血脂四项,透射电镜检测心肌细胞超微结构。结果:与CON组相比,gp120组体重增长多(p﹤0.05),动脉血压升高(p﹤0.05),心脏收缩舒张潜能降低(p﹤0.05),心肌细胞超微结构异常,肌原纤维、线粒体损伤,胶原纤维增生,可见吞噬细胞溶酶体。结论:大鼠1次尾静脉注射R5型HIV-1gp120(50μg/Kg)暴露4周可以制备大鼠HIV-1 gp120损伤模型,表现为大鼠向心性肥胖,血压升高、心脏收缩舒张潜能降低,心肌超微结构变化。第二部分甘草甜素干预保护R5型HIV-1 gp120损伤大鼠心肌的效应机制目的:探索甘草甜素对R5型HIV-1gp120损伤大鼠心肌保护效应及机制方法:4周龄雄性SD大鼠48只,分4组(n=12):CON组、gp120组、50mg/kg甘草甜素保护组(gp120+GL50)、100mg/kg甘草甜素保护组(gp120+GL100)。CON组大鼠尾静脉注射NS(50ul/kg),每天NS(0.1ml/g)灌胃1次;其余3组大鼠尾静脉注射R5型HIV-1gp120(50μg/Kg),其中gp120组每天NS(0.1ml/g)灌胃1次,gp120+GL50及gp120+GL100组分别50、100mg/kg甘草甜素灌胃1次。记录大鼠体重,连续42天(6周)。各组大鼠末次给药后,禁食12h,腹腔麻醉,左心室插管测大鼠左心室压力分析血流动力学指标(HR、LVSP、LVDP、LVP±dp/dtmax);腹主动脉取血测血脂四项(TG、TC、LDLC、HDL-C)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(T-SOD)、GSH谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、CK(磷酸激酶)、LDH(乳酸脱氢酶);取心肌组织测GSH、Na+-K+ATP酶、ALT、AST;HE染色观察心肌组织学结构,Masson染色观察心肌组织纤维化情况。结果:与CON组相比,gp120组体重增长多(p﹤0.05),左心室最大收缩速度、舒张速度下降(p﹤0.05);血脂LDL-C升高(p﹤0.05)、HDL-C下降(p﹤0.05);血清GSH降低(p﹤0.05)、心肌酶CK、LDH升高(p﹤0.05);心肌组织ALT、AST、GSH含量增加(p﹤0.05);心肌组织HE染色观察见心肌纤维水肿、排列紊乱,炎性细胞浸润;Masson染色观察见心肌组织胶原纤维增多。与gp120组相比,gp120+GL100组大鼠体重增加少(p﹤0.05);在体心脏静息状态左心室最大收缩、舒张速度快(p﹤0.05);血脂LDL-C低(p﹤0.05)、HDL-C升(p﹤0.05);血清GSH高(p﹤0.05),血浆心肌酶CK漏出少(p﹤0.05);心肌组织GSH、Na+-K+ATP酶活性低(p﹤0.05),ALT和AST活性高(p﹤0.05);心肌组织胶原纤维少,组织学结构接近正常。结论:大鼠1次尾静脉注射R5型HIV-1gp120(50μg/Kg)暴露6周制备的大鼠HIV-1 gp120损伤模型,表现为大鼠肥胖,心脏收缩舒张功能下降,血脂升高,血清抗氧化能力降低;甘草甜素(100mg/Kg.d)干预可保护大鼠防止R5型HIV-1 gp120损伤,维持大鼠体重增长和脂代谢及抗氧化代谢正常,保护大鼠心肌功能、代谢、结构。
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