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目的1.观察七氟烷预处理对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。2.通过在七氟烷预处理前或后不同时间点给予核转录因子-кB(NF-кB)抑制剂小白菊内酯(Parthenolide, PTN),探讨NF-кB在七氟烷预处理保护机制中的作用。3.通过Western Blot技术蛋白半定量分析NF-κB在心肌缺血前和心肌缺血再灌注后的表达情况,探讨NF-κB在七氟烷预处理保护机制中的作用地位。方法实验一:48只雄性SD大鼠,随机分为6组(n=8)。单纯缺血组进行单纯心肌缺血再灌注;PTN组于缺血前15min腹腔内注射NF-кB特异性抑制剂PTN 500μg/kg;DMSO组于心肌缺血前15min腹腔内注射PTN的溶剂二甲亚砜(DMSO);七氟烷组于吸入1MAC七氟烷30min,继之15min药物排出;PTN+七氟烷组于七氟烷预处理前15min腹腔内注射PTN 500μg/kg;七氟烷+PTN组于七氟烷预处理后即刻腹腔内注射PTN 500μg/kg。建立大鼠心肌缺血再灌注损伤的在体模型,阻断左冠状动脉前降支缺血30min,开放再灌注120min,实验中监测并记录血液动力学变化,实验结束用氯化三苯四氮唑(TPT)染色法测定左心室心肌梗死范围。实验二:(一)心肌缺血前组:取42只雄性SD大鼠,随机分为7组(n=6),分为空白对照组、单纯缺血组、七氟烷组、七氟烷165min组、PTN组、PTN+七氟烷组和七氟烷+PTN组,所有处理同实验一,于大鼠心肌缺血前取心肌标本,空白对照组即大鼠麻醉后不对采取任何手术和干预,于心肌缺血前的相应时间点取左心室心肌标本;七氟烷165min组吸入七氟烷30min后停止吸入165min(相当于七氟烷排除期15min+心肌缺血30min+再灌注120min)取心肌标本。采用Western blot法测定NF-кB的蛋白表达。(二)缺血再灌注后组:取42只雄性SD大鼠,随机分为7组(n=6)。分为空白对照组、单纯缺血组、七氟烷组、七氟烷165min组、PTN组、PTN+七氟烷组和七氟烷+PTN组。所有处理同实验一,分别于大鼠心肌缺血再灌注后或相应时间点取心肌标本。采用Western blot法测定NF-кB的蛋白表达。结果实验一:平衡期,各组间心率(HR),平均动脉压(MAP)和心率-收缩压乘积(RPP)无统计学意义(P>0.05)。七氟烷组、PTN+七氟烷组和七氟烷+PTN组在吸入七氟烷期间HR、MAP和RPP明显降低,再灌注1 h和2 h引起各组MAP和RPP明显降低(P<0.05)。与对照组(52.48±6.04)%相比,七氟烷组的心肌梗死范围显著减少(33.73±5.72)%,而PTN+七氟烷组(52.60±5.01)%和七氟烷+PTN组(52.39±7.00)%的心肌梗死范围明显高于七氟烷组(33.73±5.72)%(P<0.05)。实验二:(一)缺血前心肌标本比较:与空白对照组比较,七氟烷组NF-кB蛋白表达显著增多(P<0.05)。(二)缺血再灌注后心肌标本比较:与空白对照组比较,单纯缺血组NF-кB蛋白表达显著增多(P<0.05)。与单纯缺血组比较,七氟烷组NF-кB蛋白表达显著减少(P<0.05)。(三)缺血前和缺血再灌注后心肌标本比较:与缺血前单纯缺血组相比,缺血后单纯缺血组NF-кB蛋白表达显著增多(P<0.05);与缺血前七氟烷组相比,缺血后七氟烷组NF-кB蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论:实验一:七氟烷预处理缩小了大鼠心肌梗死范围,而七氟烷预处理前或后分别给予PTN都阻断了七氟烷的心肌保护作用,心肌梗死范围显著增加,NF-кB可能参与了七氟烷预处理的心肌保护机制。实验二:七氟烷预处理期间NF-кB大量激活,从而抑制了心肌缺血再灌注后期NF-кB蛋白的表达,减轻了大鼠心肌缺血再灌注的损伤且该保护作用被PTN所阻断。由此推测NF-кB参与了七氟烷预处理的心肌保护机制。