不同异种抗原胸腺修饰对猪—猴心脏移植排斥反应的作用研究

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目的 以猪—幼龄猴腹腔异位心脏移植建立起大动物异种心脏移植的延迟性异种排斥反应(DXR)模型。通过供体的不同抗原对受体进行胸腺修饰的预处理,研究胸腺修饰对大动物异种心脏移植中DXR的作用,探索诱导异种心脏移植中受体T细胞中枢性耐受的可能性。并对不同异种抗原胸腺修饰所产生效果进行比较,以寻找合适的诱导原。 方法 供体(梅山猪)和受体(中国猕猴)随机分为四组:①A组(对照组):仅行腹腔异位心脏移植;②B组(照射组):受体在d-30(移植前30天)天接受2.5Gy Co60γ射线的全身照射,d0天行心脏移植。③C组(照射+脾细胞胸腺修饰组):d-30天受体接受同等剂量全身照射后,d-23天胸腺内注射猪脾细胞(SCs)5×10~7个/只,d0天行心脏移植。④D组(照射+血管内皮细胞胸腺修饰组):d-30天受体接受同上照射后,d-23天胸腺内注射猪血管内皮细胞(VECs)5×10~7个/只,d0天行心脏移植。观察各组移植心脏的存活时间;在移植前当天作供受体单向异种混合淋巴细胞反应(XMLR)和供体VECs溶解率检测;用流式细胞仪连续检测受体外周血IgG抗体水平在移植前后的变化。 结果 ①供心平均存活时间(MST):A组(36.2±5.9h),B组(65.2±6.6h),C组(91.1±22.8h),D组(124.3±12.0h)。异种抗原胸腺修饰组(C组,D组)平均存活时间均显著延长(P<0.05),而C,D两组中,供体VECs为诱导原的D组又较供体SCs为诱导原的C组延长(P<0.05)。②供受体单向异种混合淋巴细胞反应(XMLR)刺激效应DPM值:A组(3427.1±265.8),B组(2517.1±362.9),C组(1622.5±254.5),D组(1599.4±302.6)。C,D两组XMLR刺激效应均显著减弱(P<0.05),D组与C组比较无显著差异(P>0.05)。③供体VECs溶解率:A组(56.0±3.2%),B组(42.0±2.8%),C组(33.0±3.2%),D组(24.04±2.2%)。C,D两组供体VECs溶解率均显著下降(P<0.05),D组又较C组显著下降(P<0.05)。④受体外周血IgG抗体水平变化:移植前各组之间受体不同异种抗原胸腺修饰对猪一猴心脏移植排斥反应的作用研究工gG水平无显著差异;移植后C,D两组工gG水平上升均显著减缓 (P<0.05),D组与C组比较无显著差异(P>0 .05)。⑤病理:各组排斥心脏均呈典型DXR表现。结论①异种抗原胸腺修饰可抑制猪一猴心脏移植中受体T细胞的增殖、抑制受体诱生抗体工gG的产生和减轻供心血管内皮细胞(VECs)的激活和溶解,从而缓解DXR,延长移植物存活时间,但不能完全克服DXR的发生。②在胸腺修饰诱导大动物异种心脏移植受体免疫耐受的研究中,供体血管内皮细胞可作为一种新的诱导原,且诱导效果比脾细胞更好。
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